[发明专利]一种香蕉枯萎菌4号生理小种DCL基因缺失突变体及其小RNA

摘要

本发明公开了一种香蕉枯萎菌4号生理小种DCL基因缺失突变体及其小RNA。采用同源置换的原理，构建了香蕉枯萎菌Δdcl1、Δdcl2和Δdcl1/2基因缺失突变体，并进行了非生物胁迫测试和致病力分析，结果显示经过荧光增白剂CFW处理后，Δdcl1、Δdcl2、Δdcl1/2突变体更加敏感，生长受到抑制，MgCl2处理后，Δdcl1突变体、Δdcl2突变体和Δdcl1/2突变体的生长均受到抑制。Δdcl1突变体致病力增强，Δdcl2突变体和Δdcl1/2突变体致病力减弱；此外，结合小RNA深度测序获得各突变体小RNA，为进一步解析香蕉枯萎病的致病机制，开发RNA来源的防控措施等提供理论和技术支撑。

主权项

1.一种香蕉枯萎菌4号生理小种DCL基因缺失突变体，其特征在于，通过以下方法获得：1)构建Foc4DCL1基因缺失重组DNA片段，采用潮霉素抗性基因HPH，原生质体转化，获得Foc4DCL1基因缺失突变体，即Δdcl1突变体；还可以采用相同的方法敲除DCL2基因，构建Δdcl2突变体；2)在Δdcl1突变体的基础上构建Foc4DCL1/2双基因缺失重组DNA片段，采用新霉素NEO抗性基因，原生质体转化，获得Foc4DCL1/2双基因缺失突变体，即Δdcl1/2突变体。