[发明专利]一种分析Rab8调节Klotho表达在非小细胞肺癌中的作用的方法有效
| 申请号： | 201811036353.1 | 申请日： | 2018-09-06 |
| 公开（公告）号： | CN109030835B | 公开（公告）日： | 2021-06-22 |
| 发明（设计）人： | 吴剑卿;陈波;赵卫红 | 申请（专利权）人： | 江苏省人民医院（南京医科大学第一附属医院） |
| 主分类号： | G01N33/68 | 分类号： | G01N33/68;C12Q1/6851 |
| 代理公司： | 常州市夏成专利事务所(普通合伙) 32233 | 代理人： | 沈毅 |
| 地址： | 210000 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种分析Rab8调节Klotho表达在非小细胞肺癌中的作用的方法，包括分析Rab8通过翻译后环节对调节膜表面Klotho表达的作用、分析Rab8调控Klotho膜表面表达在Wnt信号通路及EMT中的作用以及分析Rab8调控Klotho膜表面表达在非小细胞肺癌细胞功能学方面的作用。本发明首次发现，Rab8与Klotho结合，通过蛋白生物合成后途径促进其向膜表面转运，提高Klotho膜表面分布水平，抑制Wnt/β‑catenin信号激活，抑制细胞发生上皮‑间质转化，从而抑制肺癌细胞迁移、侵袭。因此，Rab8具有主动调节Klotho功能。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 分析 rab8 调节 klotho 表达 细胞 肺癌 中的 作用 方法 | ||
【主权项】：
1.一种分析Rab8调节Klotho表达在非小细胞肺癌中的作用的方法，其特征在于：包括以下步骤：（1）分析Rab8通过翻译后环节对调节膜表面Klotho表达的作用，包括插入和内吞两个相反的受体转运过程的分析，利用切割表面生物素标记技术检测Klotho内化，同时利用一种基于荧光的活细胞比率循环分析方法，以测量Klotho的再循环利用，结果表明Rab8并不参与Klotho内化；（2）分析Rab8调控Klotho膜表面表达在Wnt信号通路及EMT中的作用，包括利用Western blot检测、免疫细胞化学方法和定量RT‑PCR检测分析Rab8调控Klotho膜表面表达在Wnt信号通路中的作用，利用Western blot检测分析Rab8调控Klotho膜表面表达在EMT中的作用；（3）分析Rab8调控Klotho膜表面表达在非小细胞肺癌细胞功能学方面的作用，包括CCK8检测实验、细胞集落形成实验、划痕实验、Transwell侵袭实验和移植瘤实验。
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