[发明专利]榛子叶片和花芽总RNA提取方法无效
申请号: | 201210003007.X | 申请日: | 2012-01-06 |
公开(公告)号: | CN102424825A | 公开(公告)日: | 2012-04-25 |
发明(设计)人: | 孟晓庆;侯智霞;苏淑钗;张兰 | 申请(专利权)人: | 北京林业大学 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅;任凤华 |
地址: | 100083 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明公开了一种从植物组织中提取总RNA的方法。本发明所提供的方法包括如下步骤:1)将植物组织与PVP和维生素C混合后,再加入液氮研磨成粉末;所述植物组织、所述PVP和所述维生素C的配比为0.2g∶0.01g∶0.01g;2)将步骤1)得到的粉末加入到55-65℃的提取液中,55-65℃保温10min,得到样品混合液;3)对步骤2)得到的样品混合液进行RNA的抽提和RNA的沉淀,得到总RNA;所述抽提为用氯仿/异戊醇进行的抽提。所述提取液含有3%的CTAB、100mM的Tris-c1(pH8.0)、25mM的EDTA(pH8.0)、2M的NaCl、5%的β-巯基乙醇、3%的PVP、0.05%的三盐酸亚精胺等。实验证明,本发明所提供的方法能够从植物组织,如榛子的幼叶、雄花芽或成熟叶片中提取得到高质量的总RNA。 | ||
搜索关键词: | 榛子 叶片 花芽 rna 提取 方法 | ||
【主权项】:
从植物组织中提取总RNA的方法,包括如下步骤:1)将植物组织与聚乙烯吡咯烷酮和维生素C混合后,再加入液氮研磨成粉末;所述植物组织、所述聚乙烯吡咯烷酮和所述维生素C的配比为0.2g∶0.01g∶0.01g;2)将步骤1)得到的粉末加入到55‑65℃的权利要求6所述提取液中,55‑65℃保温10min,得到样品混合液;3)对步骤2)得到的样品混合液进行RNA的抽提和RNA的沉淀,得到总RNA;所述抽提为用氯仿/异戊醇进行的抽提;所述氯仿/异戊醇是由氯仿与异戊醇按照24∶1的体积比混合得到的混合物。
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