[发明专利]一种鸡哥伦比亚羽基因型的检测引物、检测试剂盒、检测方法及应用有效
申请号: | 201910362444.2 | 申请日: | 2019-04-30 |
公开(公告)号: | CN111850132B | 公开(公告)日: | 2021-10-22 |
发明(设计)人: | 康相涛;李转见;田亚东;刘丹丽;韩瑞丽;孙桂荣;王鑫磊;王永才;李国喜;闫峰宾;蒋瑞瑞;李红;李文婷;刘小军;王彦彬 | 申请(专利权)人: | 河南农业大学 |
主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12N15/11 |
代理公司: | 郑州睿信知识产权代理有限公司 41119 | 代理人: | 牛爱周 |
地址: | 450002 河*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 哥伦比亚 基因型 检测 引物 试剂盒 方法 应用 | ||
1.一种鸡哥伦比亚羽基因型的检测引物,其特征在于:所述检测引物的PCR扩增序列覆盖如SEQ ID NO.1所示序列的第33-95位;所述PCR扩增序列的大小分为257bp或者194bp,257bp为63bp碱基序列插入,为ZH型,如SEQ ID NO.1所示序列;194bp为63bp碱基序列缺失,为Zh型,如SEQ ID NO.2所示序列。
2.根据权利要求1所述的鸡哥伦比亚羽基因型的检测引物,其特征在于:所述检测引物的核苷酸序列如下所示:
上游引物P-F:5′- CGTATACACAGCCTGGCCTAA -3′;
下游引物P-R:5′- ATTCCTGTGTGTGGTGGAGTG -3′。
3.一种鸡哥伦比亚羽基因型的检测试剂盒,其特征在于:所述检测试剂盒中包含检测引物,所述检测引物的PCR扩增序列覆盖如SEQ ID NO.1所示序列的第33-95位;所述PCR扩增序列的大小分为257bp或者194bp,257bp为63bp碱基序列插入,为ZH型,如SEQ ID NO.1所示序列;194bp为63bp碱基序列缺失,为Zh型,如SEQ ID NO.2所示序列。
4.根据权利要求3所述的鸡哥伦比亚羽基因型的检测试剂盒,其特征在于:所述检测引物的核苷酸序列如下所示:
上游引物P-F:5′- CGTATACACAGCCTGGCCTAA -3′;
下游引物P-R:5′- ATTCCTGTGTGTGGTGGAGTG -3′。
5.根据权利要求3所述的鸡哥伦比亚羽基因型的检测试剂盒,其特征在于:还包括2×Taq PCR masterMix。
6.一种鸡哥伦比亚羽基因型的检测方法,其特征在于:包括以下步骤:
1)以待测鸡的基因组DNA为模板,用检测引物进行PCR扩增,得到PCR扩增产物;所述检测引物的PCR扩增序列覆盖如SEQ ID NO.1所示序列的第33-95位;所述PCR扩增序列的大小分为257bp或者194bp,257bp为63bp碱基序列插入,为ZH型,如SEQ ID NO.1所示序列;194bp为63bp碱基序列缺失,为Zh型,如SEQ ID NO.2所示序列;
2)对PCR扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳检测,根据电泳检测结果鉴定鸡哥伦比亚羽的基因型。
7.根据权利要求6所述的鸡哥伦比亚羽基因型的检测方法,其特征在于:所述基因型为哥伦比亚羽基因型、非哥伦比亚羽基因型;所述哥伦比亚羽基因型为ZHZH、ZHW或ZHZh基因型;非哥伦比亚羽基因型为ZhZh或ZhW基因型。
8.根据权利要求7所述的鸡哥伦比亚羽基因型的检测方法,其特征在于:所述检测引物的核苷酸序列如下所示:
上游引物P-F:5′- CGTATACACAGCCTGGCCTAA -3′;
下游引物P-R:5′- ATTCCTGTGTGTGGTGGAGTG -3′。
9.如权利要求6所述的鸡哥伦比亚羽基因型的检测方法在鸡育种方面的应用。
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