[发明专利]一种从海洋球石藻中提取邻苯二甲酸二丁酯的方法

权利要求书

1.一种从海洋球石藻中提取邻苯二甲酸二丁酯的方法,其特征在于：依次以：用乙酸乙酯进行萃取；用反相硅胶柱进行层析；用葡聚糖凝胶柱Sephadex LH-20进行层析；用反相硅胶柱进行层析；用正相硅胶柱进行层析；用PTLC制备的方法从海洋球石藻中提取邻苯二甲酸二丁酯。

2.一种如权利要求1所述的从海洋球石藻中提取邻苯二甲酸二丁酯的方法，其特征在于：包括以下步骤：

步骤一、制备海洋球石藻乙酸乙酯相萃取物：先用乙醇溶液浸提，获得乙醇浸膏，再以乙酸乙酯为萃取剂进行萃取处理，合并萃取液，减压浓缩得到海洋球石藻乙酸乙酯相萃取物；

步骤二、反相硅胶柱层析制备邻苯二甲酸二丁酯一次粗品：将获得的海洋球石藻乙酸乙酯相萃取物以反相硅胶柱进行层析处理，收集，检测、合并、减压浓缩至干，得到邻苯二甲酸二丁酯一次粗品；

步骤三、葡聚糖凝胶柱Sephadex LH-20层析制备邻苯二甲酸二丁酯二次粗品：将邻苯二甲酸二丁酯一次粗品以葡聚糖凝胶柱Sephadex LH-20进行层析处理，收集，检测、合并、减压浓缩至干，得到邻苯二甲酸二丁酯二次粗品；

步骤四、反相硅胶柱层析制备邻苯二甲酸二丁酯一次精品：将获得的邻苯二甲酸二丁酯二次粗品以反相硅胶柱进行层析处理，收集，检测、合并、减压浓缩至干，得到邻苯二甲酸二丁酯一次精品；

步骤五、正相硅胶柱层析制备邻苯二甲酸二丁酯二次精品：将获得的邻苯二甲酸二丁酯一次精品以正相硅胶柱进行层析处理，收集，检测、合并、减压浓缩至干，得到邻苯二甲酸二丁酯二次精品；

步骤六、PTLC制备邻苯二甲酸二丁酯纯品：将获得的邻苯二甲酸二丁酯二次精品进行PTLC，点样、展开，刮板，样品回收，保存于-20℃，得到邻苯二甲酸二丁酯纯品。

3.如权利要求2所述的一种从海洋球石藻中提取邻苯二甲酸二丁酯的方法，其特征在于：所述步骤一的具体方法为：海洋球石藻生长至稳定期，收获，冷冻干燥获得海洋球石藻藻粉g，用质量分数为75%的乙醇溶液浸提，获得乙醇浸膏，加入等体积的乙酸乙酯和水，反复萃取，收集乙酸乙酯相，合并、减压浓缩至干，获得海洋球石藻乙酸乙酯相萃取物。

4.如权利要求2所述的一种从海洋球石藻中提取邻苯二甲酸二丁酯的方法，其特征在于：所述步骤二的具体方法为：将海洋球石藻乙酸乙酯相萃取物用适量的分析纯甲醇溶解，加入量以甲醇正好没过萃取物为宜，进行反相硅胶柱层析；依次用水，质量分数为25%的甲醇溶液，质量分数为50%的甲醇溶液，质量分数为75%的甲醇溶液，甲醇洗脱，每个梯度洗脱1.5 L，流速控制为30 mL/min，每200 mL收集1管，旋蒸，初步用TLC分析流出物，合并邻苯二甲酸二丁酯高浓度流分段，减压浓缩至干，获得邻苯二甲酸二丁酯一次粗品。

5.如权利要求2所述的一种从海洋球石藻中提取邻苯二甲酸二丁酯的方法，其特征在于：所述步骤三的具体方法为：将邻苯二甲酸二丁酯一次粗品用适量甲醇溶解后，上葡聚糖凝胶柱Sephadex LH-20，用甲醇作为洗脱剂进行洗脱，流速控制12-13 S/drop，使用自动收集器收集各馏分，每30min收集一管，初步用TLC分析流出物，合并80至90管的馏分，减压浓缩至干，获得邻苯二甲酸二丁酯二次粗品。

6.如权利要求2所述的一种从海洋球石藻中提取邻苯二甲酸二丁酯的方法，其特征在于：所述步骤四的具体方法为：将邻苯二甲酸二丁酯二次粗品，依次采用质量分数为30%，40%，50%，60%，70%的甲醇水溶液梯度洗脱，最后用甲醇洗脱进行反相硅胶柱层析，每个梯度洗脱300 mL，流速控制为5 mL/min，旋蒸，初步用TLC分析流出物，合并邻苯二甲酸二丁酯高浓度流分段，减压浓缩至干，获得邻苯二甲酸二丁酯一次精品。

7.如权利要求2所述的一种从海洋球石藻中提取邻苯二甲酸二丁酯的方法，其特征在于：所述步骤五的具体方法为：将邻苯二甲酸二丁酯一次精品经过正相硅胶柱层析：用硅胶粉拌样，硅胶用石油醚饱和后装柱，样品上柱后用石油醚丙酮体系进行洗脱，石油醚和丙酮的体积比为200：1，收集馏分，减压浓缩至干，获得邻苯二甲酸二丁酯二次精品。