[发明专利]一种人羧酸酯酶CES2的高特异性荧光探针及其应用

权利要求书

1.一种人羧酸酯酶CES2的高特异性荧光探针底物，其特征在于：该底物的酯键可被CES2特异性水解为相应水解产物并显示与底物不同的发射波谱；

该底物为3-羟基黄酮酯类衍生物，其结构通式如式（1）所示，其中，R为苯基、对甲基苯基、对乙基苯基、对丙基苯基、对己基丙基、对硝基苯基、对氯苯基、1-奈基、2-呋喃基、2-噻吩基、（4-苯基）苯基、4-乙氧基苯基取代基中的一种。

2.权利要求1所述人羧酸酯酶CES2的高特异性荧光探针底物的应用，其特征在于：该底物作为CES2的特异性底物，可利用其水解反应活性，通过定量检测单位时间内水解产物的生成量来测定不同酶源中CES2的活性。

3.按照权利要求2所述人羧酸酯酶CES2的高特异性荧光探针底物的应用，其特征在于：所述酶源为重组表达的CES2单酶、人或动物组织制备液、或各类组织细胞生物样品。

4.按照权利要求2所述人羧酸酯酶CES2的高特异性荧光探针底物的应用，其特征在于：所述水解反应体系pH介于5.5～10.5之间；探针底物的浓度介于1/10～10Km之间；孵育体系反应温度介于20～60℃之间，同时水解产物的转化率应介于0.1%～20%之间。

5.按照权利要求2所述人羧酸酯酶CES2的高特异性荧光探针底物的应用，其特征在于：该探针底物及其水解产物均具有荧光属性，可采用荧光检测器实现产物及底物的快速灵敏检测；荧光检测条件为：激发波长308nm，在380～560nm进行荧光发射谱的检测。

6.按照权利要求2所述人羧酸酯酶CES2的高特异性荧光探针底物的应用，其特征在于：该特异性探针底物及其水解反应可用于CES2抑制剂的快速筛选及抑制能力的定量评价。