[发明专利]一种利用单克隆抗体技术生产孕马血清促性腺激素的方法在审
| 申请号： | 201210366478.7 | 申请日： | 2012-09-28 |
| 公开（公告）号： | CN102924586A | 公开（公告）日： | 2013-02-13 |
| 发明（设计）人： | 王勇;王秀丽;高飞 | 申请（专利权）人： | 内蒙古博格农牧业开发有限责任公司 |
| 主分类号： | C07K14/575 | 分类号： | C07K14/575;C07K1/22 |
| 代理公司： | 北京市中闻律师事务所 11388 | 代理人： | 蒋玉 |
| 地址： | 014010 内蒙古自治区*** | 国省代码： | 内蒙古;15 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 利用 单克隆抗体 技术 生产 血清 促性腺激素 方法 | ||
1.一种利用单克隆抗体技术生产孕马血清促性腺激素的方法，包括如下步骤：
(1)制备抗孕马血清促性腺激素单克隆抗体；
(2)制备抗孕马血清促性腺激素单克隆抗体的免疫亲和层析柱；
(3)通过抗孕马血清促性腺激素单克隆抗体的免疫亲和层析柱纯化孕马血清促性腺激素。
2.根据权利要求1所述的利用单克隆抗体技术生产孕马血清促性腺激素的方法，其特征在于包括如下步骤：
(1)制备抗孕马血清促性腺激素单克隆抗体：用孕马血清促性腺激素免疫BALB/c小鼠，再用免疫鼠的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合，经筛选克隆获得分泌抗孕马血清促性腺激素单克隆抗体的杂交瘤细胞，体内接种杂交瘤细胞，制备腹水，腹水离心除去细胞成分和其他沉淀物，收集上清液后采用protein A亲和层析柱，或者辛酸-硫酸铵沉淀法纯化出抗孕马血清促性腺激素单克隆抗体；
(2)制备抗孕马血清促性腺激素单克隆抗体的免疫亲和层析柱：将步骤(1)所得抗孕马血清促性腺激素单克隆抗体与活化的Sepharose2B或Sepharose4B连接，得免疫亲和层析柱；
(3)通过抗孕马血清促性腺激素单克隆抗体的免疫亲和层析柱纯化孕马血清促性腺激素：取孕马血清，上样所述免疫亲和层析柱，依次用0.1M Na2HPO3，0.15M NaCl，pH7.5溶液洗去杂蛋白，用0.1M Tris-醋酸，2.0M NaCl，pH 7.7溶液洗脱并收集，收集液经0.01 MNa2HPO3，0.15 M NaCl，pH 7.2溶液透析，过滤浓缩，得孕马血清促性腺激素纯品。
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