[发明专利]一种能稳定保存的人NT-proBNP制剂及其制备方法

权利要求书

1.一种能稳定保存的人NT-proBNP制剂，其特征在于，其中的NT-proBNP保存在含0.1-1%BSA，20-50%甘油和5-20%甘露醇的PH7.0-8.0的PBS缓冲液中，其中的NT-proBNP是与标签蛋白进行融合表达后经酶切去除标签蛋白后得到的纯NT-proBNP，其氨基酸序列如SEQ No.1。

2.权利要求1所述的能稳定保存的人NT-proBNP制剂用于制备检测NT-proBNP的标准品的用途。

3.权利要求1所述的能稳定保存的人NT-proBNP制剂的制备方法，其特征在于该方法包括如下步骤：在大肠杆菌中重组表达人NT-proBNP，其中NT-proBNP与标签蛋白融合表达，经分离、酶切和纯化得到人NT-proBNP后，将人NT-proBNP加入到以质量体积比计含0.1-1%BSA，20-50%甘油和5-20%甘露醇的PH7.0-8.0的PBS缓冲液中，制备得到能稳定保存的人NT-proBNP制剂。

4.根据权利要求3所述的能稳定保存的人NT-proBNP制剂的制备方法，其特征在于在表达人NT-proBNP时，采用大肠杆菌偏好的密码子，其中编码人NT-proBNP的核苷酸序列如SEQ No.2。

5.根据权利要求4所述的能稳定保存的人NT-proBNP制剂的制备方法，其特征在于在表达人NT-proBNP时，培养大肠杆菌采用的碳源是以质量体积比计1%甘油，氮源是以质量体积比计0.5%酵母粉，0.5%蛋白胨和1%NH₄Cl，无机盐添加物是5mM硫酸镁，收菌时间为6小时。

6.一种在大肠杆菌中重组表达制备人NT-proBNP蛋白的方法，其特征在于在表达人NT-proBNP时，采用大肠杆菌偏好的密码子，将NT-proBNP与标签蛋白一起融合表达，使用的编码人NT-proBNP的核苷酸序列如SEQ No.2。

7.根据权利要求7所述的在大肠杆菌中重组表达人NT-proBNP蛋白的方法，其特征在于培养大肠杆菌采用的碳源是以质量体积比计1%甘油，收菌时间为6小时。

8.根据权利要求6所述的在大肠杆菌中重组表达人NT-proBNP蛋白的方法，其特征在于培养大肠杆菌采用的氮源是以质量体积比计0.5%酵母粉，0.5%蛋白胨和1%NH₄Cl。

9.根据权利要求6所述的在大肠杆菌中重组表达人NT-proBNP蛋白的方法，其特征在于培养大肠杆菌采用的无机盐添加物为5mM硫酸镁。

10.根据权利要求6所述的在大肠杆菌中重组表达人NT-proBNP蛋白的方法，其特征在于培养大肠杆菌采用的碳源是以质量体积比计1%甘油，氮源是0.5%酵母粉，0.5%蛋白胨，1%NH₄Cl，无机盐添加物为5mM硫酸镁，收菌时间为6小时。