[发明专利]微生物样品快速检测方法及其实施检测装置

权利要求书

1.一种微生物样品快速检测方法，其特征在于包括以下工艺步骤：

（1）将抗体固定在介孔生物芯片微孔孔道面上；

（2）将待测溶液泵入流过介孔生物芯片的微孔孔道，使待测溶液所含待测物与固定在微孔孔道面上的抗体反应形成抗原-抗体复合物，富集在微孔道内；

（3）将缓冲溶液泵入流过介孔生物芯片微孔孔道，对富集在微孔孔道内的抗原-抗体复合物进行冲洗，洗除杂质；

（4）将含有荧光标记抗体或酶标记抗体的溶液泵入流过介孔生物芯片的微孔孔道，使溶液中的标记抗体与抗原-抗体复合物中的抗原进行免疫反应，形成夹心式结构的免疫复合物负载在抗体-抗原-标记抗体复合物上；当标记抗体为酶标记抗体，则需在免疫反应后泵入催化反应溶液进行酶催化显色反应，形成有色物质吸收检测光，或者泵入酶促反应发光剂，进行酶催化发光反应，产生化学发光；

（5）将缓冲溶液泵入流过介孔生物芯片微孔孔道，冲洗游离的标记抗体；

（6）用测量光对介孔生物芯片微孔孔道内的抗体-抗原-标记抗体复合物进行照射，激发荧光标记抗体发出荧光，或者酶催化显色反应形成有色物质吸收测量光形成透射光，或者酶催化发光反应产生化学发光，介孔生物芯片出来的检测光由透镜聚焦耦合到光纤，传输到光检测器进行检测处理，经检测处理后的信号传输到光信号处理控制器，输出待测生物样品的数据，实现对待测物的定量测定。

2.根据权利要求1所述的微生物样品快速检测方法，其特征在于步骤（2）中的反应条件：pH为7.0~7.6，温度为20~42℃；步骤（3）中的操作条件：温度为4~42℃；步骤（4）中的免疫反应条件：pH为7.0~7.6，温度为2~42℃，酶催化显色反应条件：pH为7.0~7.6，温度为20~42℃；步骤（5）中的反应条件：pH为7.0~7.6，温度为2~42℃。反应条件：pH为7.0~7.6，温度为20~42℃。

3.根据权利要求1或2所述的微生物样品快速检测方法，其特征在于所述抗体通过物理吸附、化学键合和生物亲和中之一的方式固定在介孔生物芯片微孔孔道面上。

4.实施权利要求1至3之一所述微生物样品快速检测方法的检测装置，其特征在于包括测量光源（7）、进样泵（6）、介孔生物芯片传感器、出射光聚焦透镜（9）、光检测器（10）和信号处理控制器（11），所述介孔生物芯片传感器由介孔生物芯片（8）和位于介孔生物芯片两侧的进液室与集液室（25）构成，介孔生物芯片上的微孔孔道（26）将进液室与集液室连通，进液室壳体设计有溶液进口接管（23），集液室（25）壳体设计有排液出口接管（24），进样泵（6）出口与进液室壳体上的溶液进口接管连通，测量光源和出射光聚焦透镜分别与介孔生物芯片对应设置，出射光聚焦透镜通过光纤（21）与光检测器连接，光检测器与光信号处理控制器信号连接，由测量光源发射出的测量光从介孔生物芯片侧壁进入介孔生物芯片照射介孔生物芯片微孔孔道内的抗体-抗原-标记抗体复合物，激发的荧光、化学发光或者对入射光进行吸收产生的透射光，从由介孔生物芯片侧壁出来，进入出射光聚焦透镜，经聚焦耦合进入光纤传输到光检测器，将检测到的光信号传输到光信号处理器，经处理输出待测生物样品的生物数据，实现对待测物的定量测定。

5.根据权利要求4所述的微生物样品快速检测装置，其特征在于还设置有检测用液储槽，检测用液储槽的出口通过连接管与进样泵的进口连接。

6.根据权利要求5所述的微生物样品快速检测装置，其特征在于并联设置有4个检测用液储槽，分别用作待测溶液、缓冲溶液、含有标记抗体溶液和催化反应溶液的储槽，各检测用液储槽的出口通过连接管、控制阀分别与进样泵的进口连接。

7.根据权利要求4所述的微生物样品快速检测装置，其特征在于还设置有废液池（12），废液池进口通过连接管与集液室壳体上的排液出口接管（24）连接。

8.根据权利要求4所述的微生物样品快速检测装置，其特征在于所述介孔生物芯片的形状为圆柱盘形，其结构为整体式结构或组合式结构。

9.根据权利要求8所述的微生物样品快速检测装置，其特征在于所述介孔生物芯片为组合结构，由介孔生物芯片本体和设置在介孔生物芯片本体不同区域的介孔材料片构成。

10.根据权利要求4至9之一所述的微生物样品快速检测装置，其特征在于所述进液室与集液室均为锥筒结构，大端分别与介孔生物芯片相联接，锥端设置有溶液进口接管（23）或排液出口接管（24）。