[发明专利]黄麻链霉菌NF0919菌株代谢产物在防治草莓病害上的应用

说明书

发明领域

本发明涉及一种微生物及用途，更具体地说涉及一种黄麻链霉菌（Streptomyces corchorusii）NF0919菌株代谢产物及其在防治草莓病害上应用，属于生物农药技术领域。 

背景技术

由植物病原真菌围小丛壳菌（Glomerella cingulata）侵染引发的草莓炭疽病、灰葡萄孢菌（Botrytis cinerea）侵染引发的草莓灰霉病、尖孢镰刀菌草莓专化型（Fusarum oxysporium Schl.f.sp.fragariae Winks et Willams）侵染引发的草莓枯病和由大丽花轮枝孢菌（Verticillium alboatrum 和 Verticillium dahliae）侵染引发的草莓黄萎病是草莓上主要的真菌病害。草莓病害防治效果的高低，将直接影响到作物产量和种植户的收益。草莓病害的防治当前主要通过化学防治来防控。主要用以下化学药剂防治：嘧菌酯（azoxystrobin）、醚菌酯(kresoxim-methyl)、苯醚甲环唑(difenoconazole)、烯肟菌酯(enestroburin)、啶酰菌胺（boscalid）、多菌灵(carbendazim)、吡唑醚菌酯（pyraclostrobin）和咪鲜胺（prochloraz）等。长期以来，由于多频次、多剂量施用化学药剂，造成炭疽病菌对常用化学药剂都产生了不同程度的抗（耐）药性，生产上屡屡出现防治失败的事例。 

目前成功用于防治病害的生物农药专用制剂还没有。文献已报道生物防治控制病害的生防菌属（种）主要有（1）木霉菌属真菌（Trichodermaspp.）中的绿色木霉（Trichoderma viride）和哈茨木霉（Trichoderma harzianum）；（2）芽孢杆菌属细菌（Bacillus spp.）中的枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、多粘芽孢杆菌（Bacillus polymyxa）和巨大芽孢杆菌（Bacillus megaterium）；（3）假单胞菌属细菌（Pseudomonas spp.）中的荧光假单胞细菌（Pseudomonas fluorescens）等。 

因草莓是即采即食的应时鲜果，且无果皮防护，所以对药剂的选择有很大的局限性。因此对草莓病害的生物防治在生产上具有一定迫切需求。本发明提供的可同时兼治草莓各类病害的颉颃细菌黄麻链霉菌NF0919菌株，在现有技术中没有提及和公开。 

发明内容

提供黄麻链霉菌（Streptomyces corchorusii）NF0919菌株发酵液中产物的提取方法，及提取物在防治草莓炭疽病、草莓灰霉病、草莓枯萎病和草莓黄萎病上的应用。 

本发明是通过以下技术方案实现的： 

本发明中提供用的黄麻链霉菌NF0919菌株的菌株特征，见专利ZL 201010236886.1。分类命 名为：黄麻链霉菌（拉丁文学名为Streptomyces corchorusii），已于2010年7月8日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏单位地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号 中国科学院微生物研究所，保藏编号为：CGMCC No. 3968。本发明的黄麻链霉菌NF0919菌株发酵液中代谢产物的提取方法，包括以下步骤：

（A）菌株的活化与一级种子培养液的培养

将保存的NF0919菌株的斜面在高氏一号培养基上活化，30℃培养10 d，挑取1 cm²大小的菌块接种于50 mL一级种子培养液中（250 mL三角瓶装培养液50 mL），置于170 rpm摇床上30℃振荡培养44～48 h，其中所述的50 mL一级种子培养液的成分为：可溶性淀粉3%，葡萄糖2%，酵母粉1%，蛋白胨1%，NaCl 0.5%，K₂HPO₄  0.2%，可溶性淀粉、葡萄糖、酵母粉、蛋白胨、NaCl 和K₂HPO₄  含量的单位比例为W/V；

（B）二级种子培养液的培养