[发明专利]黄麻链霉菌NF0919菌株代谢产物在防治草莓病害上的应用

权利要求书

1.黄麻链霉菌（Streptomyces corchorusii）NF0919菌株（该菌种特性见专利ZL 201010236886.1）发酵液中代谢产物的提取方法。

2.根据权利要求1所述的黄麻链霉菌NF0919菌株发酵液中代谢产物的提取物，在防治草莓炭疽病、草莓灰霉病、草莓枯萎病和草莓黄萎病上应用。

3.权利要求1所述的黄麻链霉菌NF0919菌株发酵液中代谢产物的提取方法，其特征在于包括以下步骤：

（A）菌株的活化与一级种子培养液的培养

将保存的NF0919菌株的斜面在高氏一号培养基上活化，30℃培养10 d，挑取1 cm²大小的菌块接种于50 mL一级种子培养液中，置于170 rpm摇床上30℃振荡培养44～48 h，其中所述的50 mL一级种子培养液的成分为：可溶性淀粉3%，葡萄糖2%，酵母粉1%，蛋白胨1%，NaCl 0.5%，K₂HPO₄  0.2%，可溶性淀粉、葡萄糖、酵母粉、蛋白胨、NaCl 和K₂HPO₄  含量的单位比例为W/V；

（B）二级种子培养液的培养

将步骤（A）所得一级种子培养液按5%的接种量接入50 mL二级种子培养液中，170 rpm、30 ℃摇床上培养48 - 52 h，其中所述的5%的单位比例为V/V；所述的50 mL二级种子培养液的成分：马铃薯淀粉8.5%，棉籽蛋白2.2%，CaCO₃ 0.1%，K₂HPO₄ 0.05%，MgSO₄ 0.05%，淀粉酶0.01%，马铃薯淀粉、棉籽蛋白、CaCO₃ 、K₂HPO₄、MgSO₄ 和淀粉酶含量的单位比例为W/V；

（C）发酵培养液的培养

将步骤（B）所得二级种子培养液按5%的接种量接种于装有160 L发酵培养液的容积为200 L的发酵罐中，其中所述的5%的单位比例为V/V，设置发酵参数为：溶氧100%，消泡剂（XP-100F系列发酵用有机硅消泡剂）1.6 L，搅拌速度为360 rpm, 发酵温度为36 ℃，发酵时间为72 h，pH 6.8～7.2，所述的发酵培养液的成分为：马铃薯淀粉8.5%，棉籽蛋白2.6%，K₂HPO₄ 0.05%，NaCl 0.2%，MgSO₄ 0.05%，CaCO₃ 0.1%，pH7.2-7.4，马铃薯淀粉、棉籽蛋白、K₂HPO₄ 、NaCl 、MgSO₄ 和CaCO₃ 含量的单位比例为W/V；

（D）NF0919菌株发酵液中代谢产物提取方法

把步骤（C）所得发酵液在10000 rpm离心5 min得上清液，用浓盐酸调节pH至2.0，出现沉淀，再次离心，收集沉淀物，用乙酸乙酯萃取3次，35℃真空干燥得提取物。