[发明专利]一种降血清胆固醇马克斯克鲁维酵母冻干菌粉的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及降血清胆固醇马克斯克鲁维酵母冻干菌粉的制备方法，适用于降血清胆固醇功能性益生菌制剂及发酵乳制品的生产。

背景技术

益生菌是指一类通过肠道定殖作用改善宿主特定部位微生态平衡并兼有若干其他有益生理功能的微生物。它们通过改善肠道微生物生态平衡，控制肠道感染，降低血清胆固醇水平，提高乳糖不耐症者对乳糖的利用，并能刺激特异性或非特异性免疫反应，具有免疫增强的作用。益生菌制品的活菌应该代谢稳定，活性较强，通过消化道后大量存活，进入肠道后发挥益生菌作用。目前用于生产益生菌制剂的优良菌种有双歧杆菌属、乳杆菌属、乳球菌属、酵母属、克鲁维酵母属等。

酵母菌包括乳糖发酵性和乳糖非发酵性二类。其中乳糖发酵性酵母有克鲁维酵母属(如马克斯克鲁维酵母、脆壁克鲁维酵母、乳酸克鲁维酵母、保加利亚克鲁维酵母)、假丝酵母属(如乳酒假丝酵母)和酒香酵母属等，是制作发酵乳制品和益生菌制剂的良好菌种。

早在1963年人们就证实摄取含有某种乳杆菌或者双歧杆菌发酵的酸奶具有降低血清胆固醇含量的功效。迄今为止，国内外学者对乳酸菌降胆固醇作用机理的研究尚存在不同观点，主要集中于以下三点：1.乳酸菌菌体细胞直接吸收同化胆固醇；2.乳酸菌的胆盐水解酶活性使结合态胆盐降解为游离态胆盐，后者溶解度下降与胆固醇发生共同沉淀作用；3.其他理论，如吸收同化与共沉淀联合作用。

有关酵母菌的益生性也有文献报道。酵母菌作为益生菌的应用起源于饲料，如Saccharomyces boulardii被用于不同类型痢疾的治疗。Psomas等(2003年)研究了Saccharomyces boulardii具有降低胆固醇的功效。

本发明所用马克斯克鲁维酵母菌K1和M3作为益生菌，可在生长代谢过程中产生大量高活力的胆盐水解酶，经过体外牛津杯试验和动物实验证明有降低机体血清胆固醇含量的功效，其降血清胆固醇的作用机理与乳酸菌有相似之处。

目前，国内利用乳酸菌制备冻干菌粉专利较多，如中国农业大学李博等人申请的“一种开菲尔冻干菌粉及其制备方法和应用”(CN1911118)是利用开菲尔粒中一系列未分离鉴定菌种制备冻干菌粉；内蒙古农业大学张和平等人申请的“干酪乳杆菌Zhang高密度培养方法、使用它们制备冻干菌粉的方法与所得到的冻干菌粉及其用途”(CN101418270)是利用干酪乳杆菌Zhang制备冻干菌粉；上海谱莱生物技术有限公司方曙光申请的“一种嗜酸乳杆菌冻干菌粉的制备方法”(CN101486986)是利用嗜酸乳杆菌制备冻干菌粉；上海谱莱生物技术有限公司方曙光申请的“一种双歧杆菌冻干菌粉的制备方法”(CN101486987)是利用双歧杆菌制备冻干菌粉。但关于利用降血清胆固醇马克斯克鲁维酵母制备冻干菌粉的方法未见国内外相关文献报道和专利报道。

发明内容

本发明的目的在于提供降血清胆固醇马克斯克鲁维酵母菌K1和M3冻干菌粉的制备方法。

本发明是通过以下技术方案实现的：

所述方法中，马克斯克鲁维酵母(Kluyveromyces marxianus)K1和M3菌株均分离筛选自吉林省普通家庭的藏灵菇，并已于2006年9月11日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为：CGMCC No.1812(菌株K1)和CGMCC No.1811(菌株M3)。

所述方法中，马克斯克鲁维酵母菌K1和M3在含有抗生素的马铃薯乳糖选择性培养基上的菌落大小为3～4mm，表面光滑，边缘整齐，呈圆形，有光泽，微隆起，乳白色，不透明；个体形态呈卵圆形或短椭圆形(K1菌株)、长椭圆形或圆柱形(M3菌株)，不形成假菌丝；无性繁殖为多边芽殖，在马铃薯乳糖培养基中生长出芽率较高，有性繁殖形成子囊孢子。马克斯克鲁维酵母菌K1和M3作为益生菌，均可降低机体血清胆固醇含量。

所述方法中，马克斯克鲁维酵母菌K1和M3的活化培养基为马铃薯乳糖液体培养基，其成分为：马铃薯200g，乳糖20g，蒸馏水1000mL。其制法为：将马铃薯去皮切块，称取200g加入1000mL蒸馏水，煮沸15～20min，双层纱布过滤，补加蒸馏水至1000mL，加入乳糖，搅拌溶化，分装，于115℃灭菌20min。