[发明专利]一种神经生长因子-紫杉醇偶联物及其制法和用途

权利要求书

1.一种神经生长因子-紫杉醇偶联物，其特征是：它是以神经生长因子为载体，通过丁二酸与紫杉醇偶联的神经生长因子-紫杉醇偶联物，该偶联物是一个神经生长因子上连接有1-6个紫杉醇分子的神经生长因子-紫杉醇偶联物。

2.根据权利要求1所述的神经生长因子-紫杉醇偶联物，其特征是：所述的神经生长因子的分子量为138-141KD。

3.一种制备权利要求1所述的神经生长因子-紫杉醇偶联物的方法，其特征是它包括如下步骤：

步骤1. 溶液A的制备：将4-12mg紫杉醇与丁二酸酐按摩尔比为1:2～1:10的比例溶在无水吡啶中，磁力搅拌，室温反应5小时后，蒸馏除去吡啶，加入1ml的二甲基甲酰胺（DMF）溶解产物，加入4.5mg N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）和3.0mg的二环己基碳二亚胺（DCC），磁力搅拌反应4小时，得到活化的紫杉醇丁二酸酐酯，离心，取上清液，即为溶液A，备用；

步骤2. 溶液B的制备：提取小鼠颌下腺神经生长因子，并采用考马斯亮兰法测定提取得到的神经生长因子的质量，按照紫杉醇和神经生长因子的摩尔比20:1 ～60:1的量，将神经生长因子溶解于0.02mol/l PH6.8的磷酸盐缓冲液中，即得到溶液B，浓度范围为0.3～0.9mg/ml；

步骤3.偶联：4℃条件下，在磁力搅拌的条件下，将溶液A逐滴加入到溶液B中，然后继续在4℃条件下，让其继续反应24～50小时后，取出离心，取上清液，浓缩后，上葡聚糖凝胶层析纯化，即得溶液C；

步骤4. 在4℃条件下，以双蒸水为透析外液，磁力搅拌的条件下，将溶液C透析48～72小时，每10小时换一次透析液；

步骤5. 冻干透析后的溶液，得到白色的神经生长因子-紫杉醇偶联物。

4.权利要求1所述的神经生长因子-紫杉醇偶联物在制备抗肿瘤药物中的应用。