[发明专利]一种Cre和Flp依赖的逆向示踪重组伪狂犬病毒的制备方法和应用有效
| 申请号： | 201710365548.X | 申请日： | 2017-05-22 |
| 公开（公告）号： | CN107699589B | 公开（公告）日： | 2019-12-13 |
| 发明（设计）人： | 贾凡;徐富强;徐小琴;缪欢;吕培 | 申请（专利权）人： | 中国科学院武汉物理与数学研究所 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N15/65;C12N7/01;C12Q1/70;G01N1/30;G01N1/28;C12R1/93 |
| 代理公司： | 42001 武汉宇晨专利事务所 | 代理人： | 龚莹莹 |
| 地址： | 430071 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明公开了一种Cre和Flp依赖的逆向示踪重组伪狂犬病毒的制备及其应用。一种Cre和Flp依赖的逆向示踪重组伪狂犬病毒制备方法，包括（1）制备Cre和Flp系统依赖的逆向示踪重组伪狂犬病毒；（2）在标记神经环路中的应用，该平台成功制备Cre和Flp独立可控的重组伪狂犬病毒。本发明成功获得Cre和Flp独立依赖的表达荧光蛋白的重组伪狂犬病毒，在神经环路标记、药物筛选平台的建立、药物抑制病毒作用机制、病毒疫苗和诊断试剂的研发、动物模型的建立、病毒复制和致病机制的分析等方面具有广泛的应用价值。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 cre flp 依赖 逆向 重组 狂犬病毒 制备 方法 应用 | ||
【主权项】：
1.一种Cre和Flp依赖的逆向示踪重组伪狂犬病毒的制备方法，包括下述步骤：/n1)Cre和Flp依赖表达绿色荧光蛋白和红色荧光蛋白的质粒构建：采用PCR扩增、酶切重组的方式将SEQ ID NO.13、SEQ ID NO.10、SEQ ID NO.7、SEQ ID NO:22、SEQ ID NO.16所示序列顺次插入载体pAAV-nEF Con/Fon hChR2(H134R)-EYFP，获得克隆命名为pleft arm-FDIO-mCherry-DIO-EGFP-CMV-BFP-right arm；/n2)Cre和Flp依赖表达绿色荧光蛋白和红色荧光蛋白的重组病毒的制备：将步骤1)中的克隆转染BHK21细胞后感染伪狂犬病毒Bartha株，收集细胞培养上清，纯化，即得重组伪狂犬病毒PRV527。/n
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于中国科学院武汉物理与数学研究所，未经中国科学院武汉物理与数学研究所许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201710365548.X/，转载请声明来源钻瓜专利网。
