[发明专利]用于检测BRCA1mRNA的核酸检测试剂盒有效
| 申请号： | 201310365818.9 | 申请日： | 2012-04-27 |
| 公开（公告）号： | CN103451282A | 公开（公告）日： | 2013-12-18 |
| 发明（设计）人： | 方国伟;周晓犊;王淑一 | 申请（专利权）人： | 杭州艾迪康医学检验中心有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;G01N21/64 |
| 代理公司： | 浙江杭州金通专利事务所有限公司 33100 | 代理人： | 黎双华;徐关寿 |
| 地址： | 310023 浙江省杭州市*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了用于检测BRCA1mRNA的核酸检测试剂盒，包括红细胞裂解液、RNA提取液、检测体系PCR反应液、阳性对照品和阴性对照品；其特征在于，检测体系PCR反应液包括PCR缓冲液、dNTP、Mg2+、检测用上下游引物BRCA1-F/BRCA1-R和探针BRCA1-Probe、参照用上下游引物Actin-F/Actin-R探针Actin-Probe；其中，BRCA1-F：CAGCTACCCTTCCATCATAAGTGA；BRCA1-R：GGCCATGTATATGCGAATCTTTTT；BRCA1-Probe：FAM-TTCTGCCCTTGAGGACCTGCGAAAT-TAMRA；Actin-F：TGAGCGAGGCTACAGCTT；Actin-R：TCCTTGATGTCGCGCACGATTT；Actin-Probe：FAM-ACCACCACGGCCGAGCGG-TAMRA。 | ||
| 搜索关键词： | 用于 检测 brca1mrna 核酸 试剂盒 | ||
【主权项】：
一种用于检测BRCA1mRNA的核酸检测试剂盒的使用方法，所述核酸检测试剂盒包括红细胞裂解液、RNA提取液、检测体系PCR反应液、阳性对照品和阴性对照品，使用方法包括以下步骤：（1）抽提组织RNA;（2）将步骤（1）的RNA反转录为cDNA；（3）配置检测体系PCR反应液；所述检测体系PCR反应液包括PCR缓冲液、d NTP、Mg2+、检测用上下游引物BRCA1‑F / BRCA1‑R和探针BRCA1‑Probe、参照用上下游引物Actin‑F/‑Actin‑R探针Actin‑Probe；其中，BRCA1‑F：CAGCTACCCTTCCATCATAAGTGABRCA1‑R：GGCCATGTATATGCGAATCTTTTTBRCA1‑Probe：FAM‑TTCTGCCCTTGAGGACCTGCGAAAT‑TAMRAActin‑F：TGAGCGAGGCTACAGCTTActin‑R：TCCTTGATGTCGCGCACGATTTActin‑Probe：FAM‑ACCACCACGGCCGAGCGG‑TAMRA；（4）将样品加入步骤（3）所述的检测体系PCR反应液中；（5）利用实时荧光PCR仪对样品进行检测；（6）检测结果判断。
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