[发明专利]一种利用米根霉菌发酵提升松花粉降脂活性的方法

说明书

本发明属于食品生物加工领域，涉及一种利用米根霉菌发酵提升松花粉降脂活性的方法，包括如下步骤：步骤一、取破壁松花粉溶于柠檬酸磷酸氢二钠缓冲液中，搅拌均匀；步骤二、将松花粉培养基进行巴氏杀菌，沸水浴加热，保温，冰水降温至室温；步骤三、用Na₂HPO₄溶液调节pH；步骤四、接种米根霉菌，发酵；步骤五、发酵后固液分离，重复提取，合并滤液，冻干，得到提取物。本发明通过米根霉发酵的方法释放松花粉中酚类活性物质，提升松花粉酚类含量，得到具有更强降脂活性的发酵松花粉提取物，所述提取物具有更强的减脂活性，且该方法温和绿色、安全性高、成本低，便于大规模生产，为开发具有更高降脂活性的松花粉产品提供理论指导。

技术领域

本发明属于食品生物加工技术领域，尤其涉及一种利用米根霉菌发酵提升松花粉降脂活性的方法。

背景技术

松花粉是我国药食同源的花粉品种，富含酚类等活性物质。研究表明，松花粉具有保护肝脏、调节糖脂代谢、免疫调节、卵巢保护等功效。马尾松花粉可显著控制小鼠的体重增长以及改善体内脂质代谢水平，且酚类成分可能是控制肥胖的有效成分。然而，前期研究结果发现，松花粉中的酚类活性成分大多以结合态形式存在，导致其无法充分地发挥功效。微生物发酵可以促进活性物质的释放及转化。为了提升松花粉中活性成分的释放及功能，目前多采用破壁的方法以破坏细胞壁中结合的活性成分，但尚未有采用发酵方法的研究。

发明内容

本发明针对上述的现有技术存在的不足，提供一种利用米根霉菌发酵提升松花粉降脂活性的方法。

本发明的具体技术方案如下：

一种利用米根霉菌发酵提升松花粉降脂活性的方法，包括如下步骤：

步骤一、取破壁松花粉溶于柠檬酸磷酸氢二钠缓冲液中，搅拌均匀；

步骤二、将松花粉培养基进行巴氏杀菌，沸水浴加热至中心温度达到80-90℃，置于80-90℃水浴中保温20-40min，保温时间到后立即冰水降温至室温；

步骤三、用Na2HPO4溶液和松花粉培养基混匀，调节pH；

步骤四、从活化好的菌悬液中接种米根霉菌，在20-40℃、150-250r/min条件下，摇瓶发酵3-5天；

步骤五、发酵结束后，以3500-5500rpm离心10-20min，固液分离；所得固体用体积浓度为70％乙醇在40-50℃下超声搅拌提取2-3h，重复提取三次，合并滤液，冻干，得到提取物。

本发明采用上述技术特征具有如下技术效果：

利用所发现的酚类含量的增加是由于米根霉发酵产生蛋白酶、淀粉酶以及糖化酶，使结合在细胞壁上的多酚类物质被释放出来，从而提升了松花粉酚类含量，得到具有更强降脂活性的发酵松花粉提取物。所述提取物具有更强的减脂活性，且该方法温和绿色、安全性高、成本低，便于大规模工厂化生产。

进一步地，所述柠檬酸磷酸氢二钠缓冲液的浓度为0.1mol/L，PH为4.3。

进一步地，所述Na₂HPO₄溶液的浓度为0.2mol/L。

进一步地，所述步骤五中，所述所得固体与所述体积浓度为70％乙醇的质量比为1:(15-25)。

进一步地，所述米根霉菌为3010米根霉菌。

进一步地，所述破壁后松花粉与(柠檬酸缓冲液+Na₂HPO₄溶液)的重量比为1:(15-25)；

进一步地，所述Na₂HPO₄溶液调节的pH为6.2-6.8。

进一步地，所述活化好的菌悬液的孢子数为10⁶个/mL。