[发明专利]一种乳腺癌相关基因PIK3CA-Q928H突变体及其特异性引物

说明书

本发明公开了一种乳腺癌相关基因PIK3CA‑Q928H突变体及其特异性引物，属于分子生物学技术领域，公开了一种乳腺癌PIK3CA基因g.179230121AC位点突变及其应用。该PIK3CA基因突变与PIK3CA正常基因序列相比具有g.179230121AC位点突变。本发明提供了乳腺癌相关基因新的突变位点，可用于早期乳腺癌筛查。

技术领域

本发明属于分子生物学技术领域，特别涉及一种乳腺癌相关基因PIK3CA-Q928H突变体及其特异性引物。

背景技术

乳腺癌是全世界妇女目前面临的最为常见的恶性肿瘤，也是引起女性死亡的重要病因。自90年代以来，中国的乳腺癌发病率增长速度是全球的2倍多，每年中国乳腺癌新发数量和死亡数量分别占全世界的12.2％和9.6％。目前，乳腺癌是中国女性发病率最高的癌症，癌症死亡原因位居第六，且年轻化趋势显著。虽然早期检查及诊断技术的提高，手术及综合辅助治疗的进步，使得患者的预后有较明显改善，但是总生存率并不理想。对于特定的分子亚型，由于对药物的原发或继发耐药、甚至缺乏特定的治疗靶点，使得部分中晚期病人缺乏有效的治疗手段。因此，寻找发生有效的肿瘤标志物对于提高乳腺癌的诊断和预测发生、发展及改善预后具有重要的临床指导意义。

肿瘤标志物可以有效地作为临床诊断依据，早期诊断、指导治疗、判断治疗疗效、检测复发及转移，是肿瘤患者的重要检查指标。乳腺癌是一种全身性疾病、其发生和发展是一个涉及多因素、多环节的复杂过程，包括癌基因的激活以及抑癌基因的失活等。因此，基因突变在乳腺癌的发生、发展过程中起着非常重要的作用。PIK3CA基因是近年来被发现除p53突变和Her-2扩增之外最常见和最重要的乳腺癌中的突变基因，突变比率高达40％，其突变可导致多条信号通路在不同水平发生调控异常，从而促进肿瘤细胞的增殖和存活。

磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)是一种可使肌醇环第三位羟基磷酸化的磷脂酰肌醇激酶，具有磷脂酰肌醇激酶和丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶双重活性，调节细胞增殖、存活、迁移、凋亡和细胞周期等多种生物学功能。PIK3CA基因编码Ⅰ类PI3K催化亚单位P110α，其定位于3q26.3，包含21个外显子，编码1068个氨基酸。现有研究显示，应用PCR或基因测序的方法检测组织中PIK3CA基因的突变情况，可提高肿瘤诊断的敏感性；PIK3CA基因突变的肿瘤细胞对PI3K抑制剂更敏感，特异性地针对PIK3CA突变的靶向治疗可有效降低恶性肿瘤的发病率和死亡率。尽管PIK3CA突变对乳腺癌的诊治及预后的影响还需进一步研究，但从目前已有的研究数据可以看出PIK3CA高频突变和突变热点区域的发现对于乳腺癌基因诊断以及靶向治疗的选择具有重要的临床意义。

发明内容

发明目的：为了克服现有技术中存在的不足，本发明提供一种乳腺癌相关基因PIK3CA-Q928H突变体及其特异性引物，通过研究乳腺癌患者及与其年龄匹配的健康对照外周血DNA中的突变，寻找与乳腺癌相关的高特异性的突变位点，为乳腺癌的筛查和诊断提供支持。

技术方案：为实现上述目的，本发明的技术方案如下：

一种乳腺癌相关基因PIK3CA-Q928H突变体，该突变基因与PIK3CA正常基因序列相比具有g.179230121AC位点突变；所述PIK3CA基因g.179230121AC位点突变是指突变位点在SEQ ID NO:1序列的第312位碱基A突变为C。

一种用于检测权利要求1所述的PIK3CA-K672N突变体的特异性引物，该特异性引物的上游引物序列如SEQ ID NO:3所示，下游引物序列如SEQ ID NO:4所示，用于检测PIK3CA基因g.179230121AC位点突变。

有益效果：本发明的该突变位点为本研究首次在中国汉族女性乳腺癌患者中发现，该突变位点在乳腺癌筛查和基因诊断中具有潜在的应用前景。通过突变位点序列的改变进行相关诊断试剂盒的研制和应用，可使得乳腺癌的诊断更加方便易行，为临床医生快速准确掌握患者病情，为临床治疗效果评价奠定基础，并为发现具有潜在治疗价值的新型小分子药物靶标提供帮助。

附图说明