[发明专利]一种烟酸通过GPR109A受体应用于治疗奶牛乳腺炎的实验方法

说明书

本发明公开了一种烟酸通过GPR109A受体应用于治疗奶牛乳腺炎的实验方法，包括以下步骤：S1、乳腺炎奶牛的筛选：初步筛选出乳腺炎为阳性的奶牛，其体细胞数约为80‑200万/mL；S2、奶牛血清和乳清中促炎因子的检测：分别在第0天和第7天收集正常奶牛、乳腺炎奶牛和饲喂烟酸的乳腺炎奶牛中的外周血，然后提取血液中的血清。本发明通过制定全新的奶牛乳腺炎治疗策略，通过分离奶牛的血清和乳清检测了烟酸治疗后乳腺炎奶牛体内促炎介质的表达，利用分子生物学方法全面的评估了烟酸对奶牛乳腺炎的治疗效果，烟酸能够有效减少奶牛血清和乳清中促炎介质的表达，从而达到保护乳腺缓解炎症的功效。

技术领域

本发明涉及医药技术领域，具体为一种烟酸通过GPR109A受体应用于治疗奶牛乳腺炎的实验方法。

背景技术

奶牛乳腺炎是一种由多种病原微生物混合感染乳腺组织所引起的一种炎症性疾病。在全世界范围内，奶牛乳腺炎都是阻碍奶牛产业健康发展的严峻问题。在最近的几十年间，奶牛乳腺炎问题并未得到很好的解决，仍然对全世界奶牛产业造成巨大经济损失。每年全球因奶牛乳腺炎所造成的经济损失高达350亿美元。而引起奶牛乳腺炎的主要原因则是病原微生物入侵奶牛乳腺。而在奶牛临床中抗生素的应用虽然可以杀灭病原微生物，但是对于一些耐药菌株和感染后的炎症反应并无太好的效果。细菌感染后，会在乳腺中产生大量内毒素，这些内毒素的主要成分就是脂多糖(LPS)。它能够引起机体产生强烈的免疫原性反应。LPS也会引发乳腺上皮细胞或巨噬细胞的免疫反应，从而分泌大量的炎性因子，损伤乳腺上皮细胞，导致乳腺炎。目前针对乳腺炎的治疗主要是抗生素配合抗炎药物的联合应用，因此抗乳腺炎药物的研发具有重要意义，这是因为单纯的抗生素应用无法很好的治愈奶牛乳腺炎，在奶牛乳腺炎的治疗过程中需要配合使用抗炎药物，以缓解奶牛乳腺中严重的炎症反应。以往的抗炎药物价格较高且有一定药物残留，在奶牛生产中药物残留会严重影响患病奶牛所产牛奶的收购，因此会严重影响奶牛场的经济效益从而造成大量经济损失。那么如何尽快恢复乳腺炎奶牛的正常生产成为治疗奶牛乳腺炎的又一难点，而本发明中应用烟酸作为一种新型抗奶牛乳腺炎的药物，具有无残留和价格低廉的特点，在奶牛乳腺炎治愈后可以快速恢复乳腺炎奶牛的泌乳和生产。

GPR109A属于G蛋白偶联受体家族，它能够通过激活下游相关信号通路来抑制炎症的发生和发展，从而达到抗炎的效果，许多研究表明GPR109A在体内参与抗炎、降脂和抗癌的功能。而烟酸作为GPR109A的配体，能够通过激活GPR109A发挥抗炎功能，并在奶牛中予以应用。

烟酸属于B族维生素。烟酸主要参与体内的脂质代谢，炎症反应和糖代谢等。前人的研究表明烟酸能够通过激活GPR109A抑制结肠炎的发展。也有人发现烟酸能抑制血管内皮细胞炎症。有研究表明传统抗炎药的长期应用很容易产生胃肠道反应、肾毒性和肝毒性等其他副作用，由于传统抗炎药物的价格昂贵，因此大规模的抗炎药应用也会造成大量经济损失。而且甾体类抗炎药物含有的激素成分会对奶牛的乳汁成分产生影响，从而影响牛奶的收购，进一步加大奶牛场的损失。而烟酸本身不会产生药物残留，且廉价易得。因此烟酸作为一种新型的抗乳腺炎药物具有传统药物不具备的优势，但是目前烟酸对于乳腺炎的作用还不清楚，因此本发明拟应用烟酸治疗和预防奶牛乳腺炎。

发明内容

(一)解决的技术问题

针对现有技术的不足，本发明提供了一种烟酸通过GPR109A受体应用于治疗奶牛乳腺炎的实验方法，在ELISA试验中证实了烟酸能够通过激活GPR109A，并且显著抑制乳腺炎奶牛乳清和血清中IL-6、TNF-α和IL-1β的蛋白表达。

(二)技术方案

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种烟酸通过GPR109A受体应用于治疗奶牛乳腺炎的实验方法，包括以下步骤：

S1、乳腺炎奶牛的筛选：初步筛选出乳腺炎为阳性的奶牛，其体细胞数约为80-200万/mL；