[发明专利]一种产油酵母菌的培养方法、微生物油脂生产方法及其应用

说明书

本发明属于废水处理技术领域，尤其涉及一种产油酵母菌的培养方法、微生物油脂生产方法及其应用。本发明提供了一种产油酵母菌的培养方法，包括以下步骤：将产油酵母菌接种至pH值为3.3～4的培养液中进行培养，其中，所述产油酵母菌在所述培养液中的初始浓度为(1～2)×10⁸cells/mL。本发明产油酵母菌的培养方法中，产油酵母菌在培养液中的初始浓度为(1～2)×10⁸cells/mL能够大大缩短产油酵母菌生长到稳定期的时间，能够在培养液原生微生物生长起来之前迅速成为优势菌，避免了培养液原生微生物带来的影响，无需控制培养条件为无菌条件就可进行产油酵母菌的培养，降低了产油酵母菌的培养成本。

技术领域

本发明属于废水处理技术领域，尤其涉及一种产油酵母菌的培养方法、微生物油脂生产方法及其应用。

背景技术

生物柴油是一种绿色可再生资源，燃烧性能好，含硫量低，能够替代化石燃料。生物柴油的生产技术分为三代，第一代生物柴油技术从食用性油料作物如油菜籽和大豆中生产生物柴油，该技术成熟并已实现工业化，但种植油料作物需要大量土地资源，会出现与粮食生产竞争土地的问题，同时其产量也远远未能满足快速增长的需求；第二代生物柴油技术从非食用性油料作物如麻风树中生产生物柴油，该技术尚未成熟，并有与第一代生物柴油技术相似的问题，或者从废煎炸油如地沟油或动物油脂中生产生物柴油，会因原材料来源有限而受到限制；第三代生物柴油技术采用产油微生物生产生物柴油，成为了生物柴油产业的新希望。

采用产油微生物生产生物柴油相比于采用油料作物有很多优势，油脂产量比油料作物高，耗水量更少，能在多种环境中生长，不需要和传统农业争夺土地资源，不需要除草剂和杀虫剂。但是，早期的微藻培养生产生物柴油需要使用大量化肥确保产量，化肥的使用会增加成本，并有造成二次污染的风险。所以，使用废水中的有机物和营养物或者农业废料作为培养产油微生物的肥料是更好的选择；另一方面，食品工业废水有机物含量高，非常适合产油微生物的生长。

然而，采用废水进行产油微生物的培养，杂菌污染问题突显，废水中的有机物和营养物多，适于很多种类微生物的繁殖，并且生长速度更快的原生细菌和真菌比外加的产油微生物更具有生长优势，对产油微生物的生长和产油有不利影响。例如在畜牧业废水中，无菌条件下的微藻的油脂产量是非无菌条件下的1.3-1.7倍，即杂菌的生长会使微藻的油脂产量降低20％-40％。

早期的第三代生物柴油技术，使用的是海水或淡水来培养微藻。由于海水或淡水有机物和氮磷等营养物质含量低、固体悬浮物少和粘度相对低易于过滤等特点，主要通过过滤除菌的方法，控制杂菌污染。与此同时，营养物质含量低也导致了油脂产量低，需要添加化肥确保产量。但是，废水中的固体悬浮物相对多，有机物和氮磷等营养物质物质含量高，部分废水具有轻微粘性，容易堵塞滤网，不便于使用过滤除菌，使得采用废水培养产油酵母生产微生物油脂主要停留在实验室研究阶段，控制杂菌污染主要采用高温蒸汽灭菌。但是，高温蒸汽灭菌需要消耗大量的能源。从生产的角度，对于废水的巨大水量，采用高温蒸汽灭菌对设备的要求高。使用抑菌剂或抗生素等会很可能产生二次污染，影响后续水处理工艺过程的效率。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种产油酵母菌的培养方法、微生物油脂生产方法及其应用，用于解决采用废水制备微生物油脂杂菌污染问题突显，采用高温高压灭菌控制杂菌污染能耗大、设备要求高等的问题。

本发明的具体技术方案如下：

本发明提供了一种产油酵母菌的培养方法，包括以下步骤：

将产油酵母菌接种至pH值为3.3～4的培养液中进行培养，其中，所述产油酵母菌在所述培养液中的初始浓度为(1～2)×10⁸cells/mL。