[发明专利]一种可提高肺部黏膜免疫应答水平的免疫佐剂及其应用

说明书

本发明公开了一种可提高肺部黏膜免疫应答水平的免疫佐剂及其应用。本发明使用黏膜免疫佐剂C48/80、黏膜免疫佐剂TMC60、氢氧化铝佐剂三种佐剂配合rPA抗原蛋白通过不同免疫接种途径对小鼠进行免疫，对不同免疫佐剂和不同免疫接种途径的免疫保护性进行了相关评价，最终筛选得到一种炭疽疫苗免疫方法：炭疽疫苗添加免疫佐剂TMC60和C48/80，肺递送气溶胶免疫接种。本发明的免疫方法可增强黏膜免疫应答，有效预防吸入性炭疽，在炭疽病的控制中可发挥重要作用。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种可提高肺部黏膜免疫应答水平的免疫佐剂及其应用。

背景技术

炭疽病是一种人畜共患烈性传染病，其临床类型分为三种：皮肤炭疽、吸入性炭疽、胃肠炭疽。吸入性炭疽又称肺炭疽，其病死率在以上三种类型中最高。由于炭疽芽孢对外环境高度耐受，可以以气溶胶形式通过呼吸道感染人群引起高死亡率，因此炭疽被认为是最危险的生物战剂。炭疽疫苗作为预防炭疽病的主要手段，在炭疽病的控制中发挥了重要的作用。而炭疽芽孢被制成生物战剂的可能性使得人们迫切需求预防吸入性炭疽的安全有效的疫苗。

目前世界上获得许可的人用炭疽疫苗主要有两类：①减毒活芽孢疫苗。该疫苗由无荚膜的减毒株芽孢制成，主要通过皮肤划痕接种，我国使用的是A16R株，对肺炭疽的保护效果不佳，并具有一定的不良反应。②炭疽弱毒株无菌培养滤液佐剂吸附/沉淀苗。包括美国FDA批准的AVA(Anthrax Vaeeine Absorbted)和英国批准的AVP(Anthrax VaccinePrecipitated)。AVA、AVP疫苗虽然有效，但其成分复杂，免疫接种程序繁琐且持续时间长，效力持续时间短，引起高比率的局部及全身不良反应，很难在普通群体中推广接种。

现有疫苗安全性和效力持续性等方面的缺陷促使了第二代炭疽疫苗得以发展。第二代疫苗是基于PA保护性抗原的基因工程重组PA亚单位疫苗(recombinant PA，rPA)，rPA疫苗克服了第一代疫苗抗原成分复杂的问题，能降低疫苗接种时的反应原性。rPA与铝佐剂联合免疫兔和非人灵长类动物模型也显示出较高的保护效力。但是rPA疫苗的最佳剂型、免疫程序以及免疫佐剂方案都需进一步进行研究。

炭疽疫苗的常规免疫途径为注射接种，然而以诱导全身免疫应答为主的注射接种途径不能在吸入性炭疽芽孢最先侵入的部位——呼吸道及时有效地诱导局部特异性抗体的产生。而疫苗通过呼吸道黏膜免疫，模拟了自然感染的过程，可以同时诱导黏膜局部和全身免疫应答，理论上是吸入性炭疽的最佳免疫途径。黏膜免疫除了可以诱导机体同时产生系统和局部免疫应答以外还具备以下优点：避免了注射接种可能引发的局部不良反应；避免了大人群免疫接种时产生大量的一次性废弃物如注射器等；避免了血液传播病原体如艾滋病毒、乙肝病毒等通过注射交叉污染；可以更有效的预防通过气道传播病原体的感染。因此近年来，用黏膜免疫途径(包括鼻、肺、胃肠道、生殖道黏膜)替代传统免疫途径接种炭疽疫苗受到广泛关注。

目前炭疽疫苗肺吸入免疫仅限于前苏联时期对安全性差的炭疽活菌苗的研究，第二代rPA疫苗以及第三代疫苗免疫途径的研究目前主要集中在较容易操作的其他黏膜免疫途径方面(如鼻、胃肠道黏膜)并且未达到理想的免疫保护效果，而肺吸入途径免疫的研究仍处于空白状态。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种免疫佐剂组合物。

本发明提供的免疫佐剂组合物由免疫佐剂TMC60和免疫佐剂C48/80组成。

上述免疫佐剂组合物中，所述免疫佐剂TMC60和免疫佐剂C48/80的质量比为6:(20-30)；所述免疫佐剂TMC60和免疫佐剂C48/80的质量比具体为6:25。

本发明的另一个目的是提供上述免疫佐剂组合物的新用途。

本发明提供了上述免疫佐剂组合物在制备炭疽疫苗中的应用。

本发明还有一个目的是提供一种炭疽疫苗。