[发明专利]含有光敏单元的核酸及其制备方法

权利要求书

1.一种含有光敏单元的核酸的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一：制备亚磷酰胺酯

（1）醚化反应

将5-羟基-2-硝基苯甲醇溶于无水吡啶，冰浴搅拌下滴加溶有4,4'-二甲氧基三苯基氯甲烷的无水吡啶得到反应液，将反应液于0℃下搅拌1小时，恢复到室温搅拌过夜，待反应结束后蒸发有机相得到粗产品，将粗产品提纯处理得到5-羟基-2-硝基苯甲基-(4,4'-二甲氧基三苯基)醚；

其中，所述5-羟基-2-硝基苯甲醇与所述4,4'-二甲氧基三苯基氯甲烷的质量比1.7:4；所述溶于无水吡啶中的5-羟基-2-硝基苯甲醇的浓度为0.017g/mL；所述溶有5-羟基-2-硝基苯甲醇的无水吡啶与溶有4,4'-二甲氧基三苯基氯甲烷的无水吡啶的体积比为10:3；所述提纯处理具体包括以下步骤：将粗产品溶于乙酸乙酯，经水洗、干燥、过滤、旋转蒸发除去有机溶剂后，将产物溶于乙酸乙酯中，逐滴加入冷却的正己烷中，过滤、干燥得到5-羟基-2-硝基苯甲基-(4,4'-二甲氧基三苯基)醚；

（2）酯化反应

将5-羟基-2-硝基苯甲基-(4,4'-二甲氧基三苯基)醚和无水三乙胺溶于无水四氢呋喃中，冰浴搅拌下滴加2-O-氰乙基-N,N-二异丙基氯代亚磷酰胺，室温下搅拌2小时，反应结束后过滤不溶物，将滤液采用饱和碳酸氢钠溶液洗涤，加入无水硫酸钠干燥，得到2-硝基苯甲基-(4,4'-二甲氧基三苯基)醚-5-(2-O-氰乙基-N,N-二异丙基亚磷酰胺酯)；

其中，所述5-羟基-2-硝基苯甲基-(4,4'-二甲氧基三苯基)醚、无水三乙胺和2-O-氰乙基-N,N-二异丙基氯代亚磷酰胺的质量比为2.3:1.2:1.27；所述无水四氢呋喃中无水三乙胺的浓度为0.024g/mL；

步骤二：制备含有光敏单元的核酸

将2-硝基苯甲基-(4,4'-二甲氧基三苯基)醚-5-(2-O-氰乙基-N,N-二异丙基亚磷酰胺酯)溶于无水乙腈中作为端基修饰位试剂与核酸进行反应，将反应产物分散于氨水中，密闭加热，离心除去不溶物，将溶液浓缩处理，得到含有光敏单元的核酸粗产物，将粗产物通过高效液相色谱进行分离和纯化，获得含有光敏单元的核酸；

其中，所述含有光敏单元的核酸，结构式如式Ⅰ所示：

式Ⅰ。