[发明专利]一种白菊的离体快速繁殖培养方法

权利要求书

1.一种白菊Dudleya greenei的离体快速繁殖培养方法，其特征在于：具体包括以下步骤：

（1）外植体的灭菌处理：外植体为白菊Dudleya greenei的侧芽，选取外植体用自来水清洗表面的赃物，流水冲洗30min-40min，在超净工作台上用75%酒精浸泡30s，无菌水清洗3-4次，再用0.1%升汞滴入2滴吐温消毒6-10min，期间不时振荡，无菌水冲洗4-5次，用无菌滤纸吸干水分，切去切口消毒受伤的部分；

（2）愈伤组织诱导：将步骤（1）得到的消毒后的外植体接种于愈伤组织诱导培养基MS+0.5-1 .0mg/L6-BA+0.01-0.1mg/LNAA+0.1-0.5mg/LKT+20-30g/L糖+7g/L琼脂中，pH值为5.8-6.0，诱导培养3-5d后外植体基部开始萌动膨大，培养 7-14d 后基部周围形成团状愈伤组织；

（3）不定芽诱导：将步骤（2）诱导形成的愈伤组织切割成0.4-0.8cm大小的切块，接种到不定芽诱导培养基MS+0.2-0.6mg/L6-BA+0.01-0.1mg/LNAA+0.05-0.1mg/LKT+20-30g/L糖+7g/L琼脂中，pH值为5.8-6.0，诱导培养5-7d后愈伤组织开始分化形成不定芽；

（4）不定芽增殖：将步骤（3）得到的不定芽分割成2-4株为一丛，接种到增殖培养基MS+0.2-0.6mg/L6-BA+0.05-0.2mg/LNAA+20-30g/L糖+7g/L琼脂中，pH值为5.8-6.0，培养30-40d后，增殖3-5倍；

（5）壮苗培养：将步骤（4）得到的增殖苗分割成2-3株为一丛，接种到壮苗培养基MS+0.2-0.6mg/L6-BA+0.1-0.3mg/LNAA+20-30g/L糖+7g/L琼脂中，pH值为5.8-6.0，培养40-50d后，形成1.5-2cm的小苗株；

（6）生根培养：将步骤（5）中得到的小苗株分割成单株接种到生根培养基MS+0.05-0.1mg/L6-BA+0.5-1.0mg/LNAA+20-30g/L糖+7g/L琼脂中，pH值为5.8-6.0，培养30-40d后，得到生根苗；

（7）炼苗移栽：将步骤（6）得到的生根苗移到温室内驯化5-7d，然后取出苗洗净植株根系附着培养基，用50%多菌灵可湿性粉剂800倍～1000倍全株浸泡10 min，取出放置于阴凉处晾干水分，栽植于基质中，遮光70-80%，保持通风，相对湿度60-80%；栽植2周后逐渐增加光照；3-4周后，植株开始生长，发新根，得到白菊Dudleya greenei完整植株。

2.根据权利要求1所述的一种白菊Dudleya greenei的离体快速繁殖培养方法，其特征在于：步骤（2）-步骤（6）中，培养条件为温度20±2℃、光照强度3000～5000lx、光照15h/d，相对湿度 50-60％。

3.根据权利要求1所述的一种白菊Dudleya greenei的离体快速繁殖培养方法，其特征在于：步骤（7）中，生根苗放置于阴凉处晾干水分至苗轻微萎焉。

4.根据权利要求1所述的一种白菊Dudleya greenei的离体快速繁殖培养方法，其特征在于：步骤（7）中，所述基质包括腐殖土、蛭石、珍珠岩，其比例为1：1：1。

5.根据权利要求1所述的一种白菊Dudleya greenei的离体快速繁殖培养方法，其特征在于：步骤（7）中，生根苗栽植于基质后，每周喷施一次1/4MS营养液和0.1%多菌灵。