[发明专利]AtAGM2与AtAGM3编码基因及酶的制备与应用

权利要求书

1.一种乙酰葡萄糖胺磷酸变位酶AtAGM2的编码基因，其核苷酸序列具有如下特征中的一种或二种以上：

1)具有序列表中SEQ ID NO.1的脱氧核糖核酸(DNA)序列；

2)编码SEQ ID NO.2氨基酸序列的脱氧核糖核酸(DNA)序列；

3)对序列表中SEQ ID NO.1的脱氧核糖核酸(DNA)序列进行一个或两个以上核苷酸取代、缺失或添加而得到的编码具有乙酰葡萄糖胺磷酸变位酶活性的核苷酸序列。

2.一种乙酰葡萄糖胺磷酸变位酶AtAGM3的编码基因，其核苷酸序列具有如下特征中的一种或二种以上：

1)具有序列表中SEQ ID NO.3的脱氧核糖核酸(DNA)序列；

2)编码SEQ ID NO.4氨基酸序列的脱氧核糖核酸(DNA)序列；

3)对序列表中SEQ ID NO.3的脱氧核糖核酸(DNA)序列进行一个或两个以上核苷酸取代、缺失或添加而得到的编码具有乙酰葡萄糖胺磷酸变位酶活性的核苷酸序列。

3.一种权利要求1所述的乙酰葡萄糖胺磷酸变位酶AtAGM2的编码基因编码的乙酰葡萄糖胺磷酸变位酶，其特征在于：其氨基酸序列具有如下特征中的一种或二种：

1)序列表中SEQ ID NO.2从氨基端开始的第1-625位氨基酸残基序列；

2)对序列表中SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列进行一个或两个以上氨基酸取代、缺失或添加而形成的具有乙酰葡萄糖胺磷酸变位酶活性的氨基酸序列。

4.一种权利要求2所述的乙酰葡萄糖胺磷酸变位酶AtAGM3的编码基因编码的乙酰葡萄糖胺磷酸变位酶，其特征在于：其氨基酸序列具有如下特征中的一种或二种：

1)序列表中SEQ ID NO.4从氨基端开始的第1-623位氨基酸残基序列；

2)对序列表中SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列进行一个或两个以上氨基酸取代、缺失或添加而形成的具有乙酰葡萄糖胺磷酸变位酶活性的氨基酸序列。

5.一种权利要求3或4所述的乙酰葡萄糖胺磷酸变位酶的应用，其特征在于：该酶可以对乙酰葡萄糖胺-6-磷酸(GlcNAc-6-P)，乙酰葡萄糖胺-1-磷酸(GlcNAc-1-P)，葡萄糖胺-6-磷酸(GlcN-6-P)，葡萄糖胺-1-磷酸(GlcN-1-P)与葡萄糖-6-磷酸(Glc-6-P),葡萄糖-1-磷酸(Glc-1-P)等中的一种或二种以上己糖磷酸具有变位活性。

6.一种权利要求3与4所述的乙酰葡萄糖胺磷酸变位酶的制备方法，其特征在于：是将乙酰葡萄糖胺磷酸变位酶AtAGM2或者AtAGM3的编码基因克隆入重组表达载体，导入宿主细胞，获得重组表达的乙酰葡萄糖胺磷酸变位酶；

上述乙酰葡萄糖胺磷酸变位酶AtAGM的编码基因，其核苷酸序列具有如下特征中的一种或二种以上：

1)具有序列表中SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.3的脱氧核糖核酸(DNA)序列，

2)编码SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.4氨基酸序列的脱氧核糖核酸(DNA)序列，

3)对序列表中SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.3的脱氧核糖核酸(DNA)序列进行一个或两个以上核苷酸取代、缺失或添加而得到的编码具有乙酰葡萄糖胺磷酸变位酶活性的核苷酸序列；

所述的重组表达乙酰葡萄糖胺磷酸变位酶的表达载体，是指大肠杆菌表达载体、酵母表达载体、枯草杆菌表达载体、乳酸菌表达载体、链霉菌表达载体、噬菌体载体、丝状真菌表达载体、植物表达载体、昆虫表达载体或哺乳动物细胞表达载体中的一种或二种以上。