[发明专利]酞酸酯类塑化剂通用半抗原、抗原的合成方法及应用无效
申请号: | 201410368522.7 | 申请日: | 2014-07-30 |
公开(公告)号: | CN104130144A | 公开(公告)日: | 2014-11-05 |
发明(设计)人: | 孙凤霞;罗小玲;彭夏雨;卢春霞;康立超;唐宗贵;方婷婷;谢勇 | 申请(专利权)人: | 新疆农垦科学院;孙凤霞 |
主分类号: | C07C227/04 | 分类号: | C07C227/04;C07C229/62;C07K14/765;C07K14/77;C07K14/795;C07K1/107;C07K16/44;G01N33/544 |
代理公司: | 无 | 代理人: | 无 |
地址: | 832000 新疆维*** | 国省代码: | 新疆;65 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 酞酸酯类 塑化剂 通用 半抗原 抗原 合成 方法 应用 | ||
1.一种酞酸酯类塑化剂的通用半抗原,其分子结构式如式(1)所示:
。
2.一种酞酸酯类塑化剂的通用人工抗原,其特征在于:是在权利要求1中所述的通用半抗原式(1)的氨基基团上偶联载体蛋白得到的分子。
3.权利要求2所述的载体蛋白为牛血清白蛋白BSA、鸡卵清白蛋白OVA、人血清白蛋HSA 、钥孔血蓝蛋白KLH中的一种。
4.权利要求1所述的通用半抗原的合成方法,其合成步骤为:
(1)取10-20g的4-硝基邻苯二甲酸,加入到30mL无水乙醇,边搅拌边缓慢加入H2SO4,120℃反应7h,蒸馏除去反应产生的水和多余的乙醇;趁热转至冰水中,取析出固体用10%的Na2CO3(pH7-8)洗涤至水层无色后,用无水乙醇重结晶得到浅黄色晶体;
(2)取0.7-1.5g的浅黄色晶体溶于200mL苯中,加入纯锌粉,分次加入浓HCL,室温下搅拌12h后向反应液中加入冷水,用NaOH中和反应液至碱性,用苯进行分离萃取,萃取液经水洗后用无水Na2SO4干燥,蒸馏除去苯后用无水乙醇重结晶,得到淡黄色晶体,即为酞酸酯类塑化剂通用半抗原。
5.权利要求2所述的通用人工抗原的合成方法,其合成步骤为:
(1)取酞酸酯类塑化剂通用半抗原加入N,N-二甲基甲酰胺(DMF)中,在室温磁力搅拌下至充分溶解后,4℃下逐滴加入2.5%的戊二醛溶液,半抗原:戊二醛=1:2(摩尔比),避光混匀并在磁力搅拌下反应2h,得到A液;
(2)取牛血清白蛋白,半抗原:牛血清白蛋白=80:1(摩尔比),用pH9.6,0.05M的碳酸盐缓冲液溶解,低温保存,此液为B液;
(3)在冰水浴中将A液缓慢滴加到B液中,并在搅拌条件下继续反应过夜,将混合液移入透析袋中,用PBS缓冲液透析3-4天,每天更换2次PBS缓冲液;使用冻干法将透析袋中的液体制成粉末,即得到酞酸酯类塑化剂通用人工抗原。
6.权利要求2和3所述的通用人工抗原的应用,其特征在于在制备抗血清、抗体或杂交瘤细胞中的应用。
7.权利要去2和3所述的通用人工抗原的应用,其特征在于在检测酞酸酯类塑化剂、食品或环境介质中的酞酸酯类塑化剂残留中的应用。
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