[发明专利]一种制备内源性洋地黄因子的方法

权利要求书

1.一种制备内源性洋地黄因子的方法，其特征在于： 

（1）取胎盘，切成块状，用液氮冷冻，保存于-80℃； 

（2）冷冻胎盘切片后放入匀浆器中，将匀浆器放入液氮罐中50-70秒后，取出匀浆器，在1400转/分钟-1600转/分钟下，匀浆4-6分钟； 

（3）取出匀浆组织，加入等体积的有机溶剂，混合均匀，在1400转/分钟-1600转/分钟下离心4-6分钟，静置； 

（4）取上清液，回收有机溶剂至尽，用超滤膜离心超滤，在2800转/分钟-3200转/分钟下离心8-12分钟，保留透过液； 

（5）透过液中加入地高辛抗体，混合均匀，室温下放置25-35分钟，用超滤膜离心超滤，在800转/分钟-1200转/分钟下离心超滤8-12分钟，保留未透过物质，透过液弃去； 

（6）未透过物质加入甘氨酸溶液，混合均匀，用超滤膜离心超滤，在800转/分钟-1200转/分钟下离心8-12分钟，透过液浓缩，得到内源性洋地黄因子； 

或者取血加入等体积的有机溶剂，混合均匀，在1400转/分钟-1600转/分钟下离心4-6分钟，静置；取上清液，回收有机溶剂至尽，用超滤膜离心超滤，在2800转/分钟-3200转/分钟下离心8-12分钟，保留透过液；透过液中加入地高辛抗体，加入地高辛抗体的体积与透过液体积等量，混合均匀，室温下放置25-35分钟，用超滤膜离心超滤，在800转/分钟-1200转/分钟下离心超滤8-12分钟，保留未透过物质，透过液弃去；未透过物质加入甘氨酸溶液，甘氨酸的浓度为0.3摩尔/升，体积与未透过物质体积等量，混合均匀，用超滤膜离心超滤，在800转/分钟-1200转/分钟下离心8-12分钟，透过液浓缩，真空浓缩，真空度为-0.1MPa，浓缩温度为40-50℃，得到内源性洋地黄 因子。 

2.根据权利要求1所述的一种制备内源性洋地黄因子的方法，其中所述有机溶剂为甲醇或乙醇。 

3.根据权利要求1所述的一种制备内源性洋地黄因子的方法，其中所述超滤膜为截取分子量为10000的超滤膜。 

4.根据权利要求1所述的一种制备内源性洋地黄因子的方法，其中步骤（5）中加入地高辛抗体的体积与透过液体积等量。 

5.根据权利要求1所述的一种制备内源性洋地黄因子的方法，其中步骤（6）中加入甘氨酸的浓度为0.3摩尔/升，体积与未透过物质体积等量。 

6.根据权利要求1所述的一种制备内源性洋地黄因子的方法，其中所述浓缩为真空浓缩，真空度为-0.1MPa，浓缩温度为40-50℃，时间30-40分钟。