[发明专利]布劳特菌AUH-JLD56及其在牛蒡苷元转化中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及细菌技术领域。 

背景技术

牛蒡子（Actium lappa）为菊科草本植物牛蒡的干燥成熟果实，在我国古代医药典籍中多有记载，具有疏散风热、宣肺透疹、消肿解毒等功效，临床上则主要用于治疗急性咽喉肿痛、风热感冒、喉源性咳嗽和出疹性疾病等，迄今已有几千年的使用史。由于牛蒡子毒副作用低，临床应用中尚未见有不良反应的报告，因此，对牛蒡子中药理活性物质的研究和挖掘已成为国内外研究热点。木质素和挥发油是牛蒡子中的标志性化合物，目前已从牛蒡子中分离得到17种木质素类化合物，其中牛蒡苷（Arctiin，简称AT）是含量最高的木质素成分之一。研究表明，AT在酸性条件下或在人肠道微生物菌群产生的葡萄糖苷酶作用下，可被水解为牛蒡苷元（Arctigenin，简称AG），AG具有抗肿瘤、抗炎、抗病毒以及免疫调节活性，对肝细胞等具有保护作用（中草药，39（3）:467-470, 2008）。 

牛蒡苷元被人体或其他动物摄入体内后可被寄居在肠道的微生物菌群转化为不同代谢产物。早在1992年，日本学者Mitsuhiko Nose等（Planta Medicine, 58(6):520-523, 1992）利用小鼠肠道菌群转化牛蒡苷元时曾检测到3′-位脱去甲基的牛蒡苷元代谢产物，即3′-去甲基-牛蒡苷元（3′-desmethylarctigenin，简称3′-DMAG），由于代谢产物3′-DMAG 从未在天然牛蒡子提取物被检出报道，故推测是小鼠肠道菌群将AG转化为3′-DMAG。2007年，日本学者 Masao Hattori等从人新鲜粪样中分离了一株能将底物AG同时代谢为 7种不同代谢产物的真细菌属菌株Eubacteriumsp. ARC-2（Biological and Pharmaceutical Bulletin,30（5）: 904-911, 2007），仅从高效液相色谱所出峰的峰面积来看，产物4（即4′-O-methyl-dihydroxyenterolactone）和产物7（即3′′-desmethylarctigenin）最高，产物1（即 dihydroxyenterolactone）的峰面积也较高，产物3′-DMAG为高效液相色谱图Fig.2中的峰6。但从通过硅胶柱后获得物质质量来看，产物1（63毫克）和产物4（63.5毫克）的量最多。因此，代谢产物3′-DMAG因合成量较低，根本无法通过菌株ARC-2转化底物牛蒡苷元来大量获得。对于产物3′-DMAG而言，迄今国内外尚未见能将底物牛蒡苷元只转化为3′-DMAG的报道；有关化合物3′-DMAG的化学合成虽在2011年有过报道，但反应需要有恶臭和强刺激性的物质吡啶来合成（辽宁中医药大学学报, 13（4）:30-33, 2011），合成过程对人体健康危害较大，且化学合成所需成本较高，基于此原因，目前国内外市场尚无3′-DMAG销售。由于化合物3′-DMAG资源匮乏，有关其生理活性方面研究报道较少，目前仅一篇文献报道3′-DMAG除具有与AG相似的抗炎活性外，还表现出不同于AG的一些生理功能，如相同浓度下3′-DMAG对雌激素受体的亲和力明显强于AG（Molecules, 18: 1122-1127, 2013）。随着3′-DMAG生理功能研究的不断深入，今后极有可能将3′-DMAG开发为不同于目前牛蒡子药效的其他新药。 

发明内容

本发明提供一种布劳特菌（Blautia sp.）AUH-JLD56及其在牛蒡苷元转化中的应用，此菌株能将中药牛蒡子中的牛蒡苷元（AG）粗品高效转化为3′-DMAG，解决了3′-DMAG资源缺乏的问题，对3′-DMAG 药理活性及新药研发具有极大的推动作用。 

本发明所采取的技术方案是： 

一种布劳特菌（Blautia sp.）AUH-JLD56，保藏号为CGMCC No.8032。

布劳特菌Blautia sp. AUH-JLD56（KF374935）是从人粪样中分离得到的一株革兰氏阳性严格厌氧细菌菌株，该菌株在厌氧工作站内能将中药牛蒡子提取物的酸水解物粗品（即牛蒡苷元粗品）高效转化为3′-DMAG。有关3′-DMAG微生物生物合成途径如下所示：