[发明专利]修饰的因子VII多肽及其应用

权利要求书

1.修饰的因子VII(FVII)多肽，其包含异源γ-羧基谷氨酸(Gla)结构域或者其实现磷脂结合的足够部分，其中:

所述修饰的FVII多肽具有促凝血剂活性；

所述异源Gla结构域选自因子X(FX)、凝血酶原、C蛋白、S蛋白、骨钙素、基质Gla蛋白、生长停滞特异性蛋白6(Gas6)和Z蛋白中的Gla结构域;以及

所述足够部分是来自所述异源Gla结构域的30个或更多个连续氨基酸，由此与具有天然Gla结构域的FVII多肽相比，所述FVII多肽的磷脂结合被改变。

2.修饰的FVII多肽，其包含异源Gla结构域或者其实现磷脂结合的足够部分，其中:

所述异源Gla结构域选自因子IX(FIX)、因子X(FX)、凝血酶原、C蛋白、S蛋白、骨钙素、基质Gla蛋白、生长停滞特异性蛋白6(Gas6)和Z蛋白中的Gla结构域;

所述修饰的FVII多肽具有促凝血剂活性；

所述足够部分是来自所述异源Gla结构域的30个或更多个连续氨基酸，由此与具有天然Gla结构域的FVII多肽相比，所述FVII多肽的磷脂结合被改变；以及

所述修饰的FVII多肽包含一或多个进一步的氨基酸修饰，其中所述修饰选自：增加对抗凝血酶-III(AT-III)的抗性、增强对磷脂的结合和/或亲和性、增加对组织因子(TF)的亲和性、增加内在活性、增加TF依赖性催化或者凝血活性、增加凝血活性、改变多肽构象以改变酶原性、通过改变高活性与低活性FVIIa构象之间的平衡使之有利于高活性构象而增加催化或凝血活性、增加对蛋白酶的抗性、降低糖基化、增加糖基化、降低免疫原性、增加稳定性、和/或促进化学基团连接的插入、缺失和取代。

3.权利要求1的修饰的FVII多肽，其中所述异源Gla结构域具有SEQ ID NO:110-118、120和121任一项所示的氨基酸序列，或者其实现磷脂结合的足够部分。

4.权利要求2的修饰的FVII多肽，其中所述异源Gla结构域具有SEQ ID NO:110-118、120和121任一项所示的氨基酸序列，或者其实现磷脂结合的足够部分。

5.权利要求2的修饰的FVII多肽，其包含选自Gla Swap FIX、Gla Swap FX、Gla Swap Prot C、Gla Swap Prot S、和Gla Swap凝血酶的修饰。

6.权利要求1的修饰的FVII多肽，其包含位于如下位置处的一或多个进一步的氨基酸修饰，所述位置选自具有SEQ ID NO:3所示氨基酸序列的FVII多肽中的D196、K197、K199、G237、T239、R290和K341或FVII多肽中的对应残基。

7.权利要求2的修饰的FVII多肽，其中：

修饰的FVII多肽含有进一步的修饰，与未修饰的FVII多肽相比表现出对组织因子途径抑制剂(TFPI)的抗性增强。

8.权利要求7的修饰的FVII多肽，其中所述进一步修饰是位于如下位置处的一或多个氨基酸修饰，所述位置选自具有SEQ ID NO:3所示氨基酸序列的FVII多肽中的D196、K197、K199、G237、T239、R290和K341或FVII多肽中的对应残基。

9.权利要求8的修饰的FVII多肽，其中所述一或多个氨基酸修饰选自对应于如下的置换：D196K、D196R、D196A、D196Y、D196F、D196M、D196W、D196L、D196I、K197Y、K197A、K197E、K197D、K197L、K197M、K197I、K197V、K197F、K197W、K199A、K199D、K199E、G237W、G237T、G237I、G237V、T239A、R290A、R290E、R290D、R290N、R290Q、R290K、K341E、K341R、K341N、K341M、K341D、K341Q、G237T238insA、G237T238insS、G237T238insV、G237T238insAS、G237T238insSA、D196K197insK、D196K197insR、D196K197insY、D196K197insW、D196K197insA、D196K197insM、K197I198insE、K197I198insY、K197I198insA和K197I198insS。