[发明专利]一种富含GABA酸奶的制备方法

权利要求书

1.一种富含GABA酸奶的制备方法，其特征在于富含GABA酸奶的制备方法按以下步骤实现：

一、将取自-80℃保存的植物乳杆菌NDC 75017、保加利亚乳杆菌11057和嗜热链球菌CICC 20379，进行复苏、纯化和活化；

二、按2％的接种量将活化后的植物乳杆菌NDC 75017接种到含L-谷氨酸钠的终浓度为30mM、维生素B₆的终浓度为5μM的MRS液体培养基中，在30℃下培养10～12h，获得扩大培养液A；

三、按2％的接种量将活化后的保加利亚乳杆菌11057接种到MRS液体培养基中，在37℃下培养10～12h，获得扩大培养液B；

四、按2％的接种量将活化后的嗜热链球菌CICC 20379接种到M17液体培养基中，在37℃下培养10～12h，获得扩大培养液C；

五、将扩大培养液A、B和C，分别离心获取菌体，然后用0.9％的生理盐水洗涤三次，再将菌体分别悬浮到灭菌奶中，得到菌液A₁、B₁和C₁，且A₁、B₁和C₁三种菌液的菌数数量级均为10¹⁰CFU/mL；

六、按体积比0.5∶0.5∶1.5将菌液A₁、菌液B₁和菌液C₁混合，获得发酵剂；

七、按2％的接种量将发酵剂接种到含L-谷氨酸钠的终浓度为30mM、维生素B₆的终浓度为5μM的灭菌奶中在43℃下发酵3～4h，pH降至4.5后，将其放置到4℃条件下后熟12h，即完成富含GABA酸奶的制备；

其中步骤一中植物乳杆菌NDC 75017，已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC NO：5448，保藏日期为2011年11月08日；

步骤一中保加利亚乳杆菌11057购买自中国微生物菌种网；

步骤一中嗜热链球菌CICC 20379购买自中国微生物菌种网。

2.根据权利要求1所述的一种富含GABA酸奶的制备方法，其特征在于步骤二中MRS液体培养基每升由5g的蛋白胨、5g的牛肉膏、5g的酵母粉和10g的胰蛋白胨、1.0mL的Tween-80、20g的葡萄糖、各10毫升的5种盐溶液及余量的蒸馏水组成，调pH至5.8，121℃高压灭菌20min；所述5种盐溶液：20g K₂HPO₄·3H₂O+100mL蒸馏水，20g柠檬酸氢二铵+100mL蒸馏水，50g乙酸钠+100mL蒸馏水，5.8g MgSO₄·7H₂O+100mL蒸馏水，2.5gMnSO₄·H₂O+100mL蒸馏水。

3.根据权利要求1所述的一种富含GABA酸奶的制备方法，其特征在于步骤三中MRS液体培养基每升由5g的蛋白胨、5g的牛肉膏、5g的酵母粉和10g的胰蛋白胨、1.0mL的Tween-80、20g的葡萄糖、各10毫升的5种盐溶液及余量的蒸馏水组成，调pH至5.8，121℃高压灭菌20min；所述5种盐溶液：20g K₂HPO₄·3H₂O+100mL蒸馏水，20g柠檬酸氢二铵+100mL蒸馏水，50g乙酸钠+100mL蒸馏水，5.8g MgSO₄·7H₂O+100mL蒸馏水，2.5gMnSO₄·H₂O+100mL蒸馏水。

4.根据权利要求1所述的一种富含GABA酸奶的制备方法，其特征在于步骤四中M17液体培养基由42.3g的M17肉汤和1000mL的蒸馏水组成。