[发明专利]一种疏血通制剂的质量检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及中药制剂的质量检测方法，具体地说，本发明涉及一种疏血通制剂的质量检测方法。

背景技术

疏血通是以地龙和水蛭为原料的中药制剂，其剂型通常为注射液，用于治疗急性期脑梗塞，具有抗栓、溶栓、改善血液循环的作用。授权公告号CN1192782C，公告日2005年3月16日，发明名称“治疗心脑血管疾病的注射剂的制造方法及其产品”的发明专利公开了该中药制剂及其制备方法。

目前，疏血通注射液执行的是国家药品标准WS3-548(Z-084)-2005(Z)。但是，该标准中对药品成分的检测指标要求相对宽泛与模糊，除中国药典中规定的常规水针注射液所要求的检测项目外，针对具体成分的检测不够具体，如仅对其中的总煻、总多糖、总氨基酸进行了规定，未进一步对单糖、多糖及氨基酸、小分子肽的具体成分进行研究。此外，指纹图谱中仅明确了共有峰的归属(来源)，而未就具体的峰成分进行定性研究及归类。

发明内容

本发明的目的是提供一种疏血通制剂的质量检测方法。

为了实现本发明目的，本发明提供一种疏血通制剂的质量检测方法，其特征在于，该方法包括含量测定及指纹图谱鉴定，其中，含量测定包括氨基酸含量测定和糖含量测定；指纹图谱鉴定包括氨基酸指纹图谱鉴定、糖指纹图谱鉴定和小分子物质指纹图谱鉴定；

所述疏血通制剂用如下方法制得：将水蛭和地龙分别用2～4倍体积的生理盐水浸提15～30小时，过滤，以体积百分书计，将33％～84％水蛭生理盐水提取液与16％～67％地龙生理盐水提取液的比例混合。

本发明的质量检测方法，其中所述所述氨基酸含量测定包括如下步骤：

1)对照品溶液的制备

分别精密称取10mg或15mg氨基酸标准品，用0.1N盐酸定容至5ml，制得17种氨基酸储备液；所述氨基酸标准品选自天门冬氨酸标准品、甘氨酸标准品、苏氨酸标准品、丙氨酸标准品、酪氨酸标准品、胱氨酸标准品、苯丙氨酸标准品、异亮氨酸标准品、亮氨酸标准品、脯氨酸标准品、谷氨酸标准品、丝氨酸标准品、组氨酸标准品、精氨酸标准品、缬氨酸标准品、蛋氨酸标准品和赖氨酸标准品；

然后分别精密吸取0.5mL、1mL或2mL上述17种氨基酸储备液，混合后用0.1N盐酸定容至25mL，制得1号混合对照品溶液；

2)标准曲线的制备

精密量取2mL、3mL、4mL上述1号混合对照品溶液，分别用0.1N盐酸定容至5mL，得2号、3号、4号混合对照品溶液；取2mL 3号混合对照品溶液，用0.1N盐酸定容至5mL，得5号混合对照品溶液；取2mL 4号混合对照品溶液，用0.1N盐酸定容至5mL，得6号混合对照品溶液；取1mL 3号混合对照品溶液，用0.1N盐酸定容至10mL刻度，得7号混合对照品溶液；

分别将上述1-7号混合对照品溶液注入液相色谱仪测定峰面积，以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线；其中，色谱条件与系统适用性试验为：

色谱柱：4.6×150mm，3.5μm Zorbax Eclipse-AAA柱；流速：2mL/min，流动相组成：A相pH7.8的40mmol/L Na2HPO4溶液、B相乙腈∶甲醇∶水＝40～50∶40～50∶10，优选为乙腈∶甲醇∶水＝45∶45∶10，以A相与B相的体积比为0～100∶100～0进行梯度洗脱；检测波长：338nm、262nm；柱温为40℃；进样量：1μL；理论板数按丙氨酸峰计算应不低于10000；

3)游离氨基酸含量测定

取1mL待测样品，用0.1N盐酸定容至5mL，制得未水解样品；按照步骤2)的色谱条件测定峰面积，从标准曲线上读出供试品溶液中氨基酸的含量，计算得出；

4)总氨基酸含量测定

精密量取0.5mL待测样品，加入2mL含1％苯酚的6N盐酸，冲氩气10秒后，密封于110℃水解22h后，冷却至室温；然后加入1mL40％NaOH溶液，混匀，用0.1N盐酸定容至5mL，制得水解样品；按照步骤2)的色谱条件测定峰面积，从标准曲线上读出供试品溶液中氨基酸的含量，计算得出。