[发明专利]一种快速筛选CRISPR-Cas9基因组编辑gRNA靶位点的方法在审
| 申请号： | 202110461387.0 | 申请日： | 2021-04-27 |
| 公开（公告）号： | CN113088559A | 公开（公告）日： | 2021-07-09 |
| 发明（设计）人： | 毕方铖;张森;吴少平;胡春华;窦同心;易干军 | 申请（专利权）人： | 广东省农业科学院果树研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/66 | 分类号： | C12Q1/66;G01N21/64 |
| 代理公司： | 北京慕达星云知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11465 | 代理人： | 崔自京 |
| 地址： | 广东省广州市*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种快速筛选CRISPR‑Cas9基因组编辑gRNA靶位点的方法，涉及基因编辑技术领域，包括以下步骤：(1)在靶标基因的不同位置设计N个靶点，分别构建基因组编辑载体和LUC融合靶点的表达载体；(2)测试LUC融合靶点后载体中双荧光素酶能正常表达；(3)将N个靶点的基因组编辑载体与LUC融合靶点载体共表达原生质体，利用双荧光素酶报告系统测定原生质体LUC和REN的活性，比较N个靶点LUC/REN的比值，确定最小比值者为最佳靶点。本发明方法具有靶位点的选择不受限制性内切酶位点的限制，可选择性广，且成本低，能够快速筛选出基因编辑活性高的靶位点进行下一步CRISPR‑Cas9基因组编辑工作。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 快速 筛选 crispr cas9 基因组 编辑 grna 靶位点 方法 | ||
【主权项】：
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