[发明专利]一种表达β-甘露聚糖酶和α-半乳糖苷酶的毕赤酵母的制备方法及其应用在审
| 申请号： | 202110270376.4 | 申请日： | 2021-03-12 |
| 公开（公告）号： | CN113151026A | 公开（公告）日： | 2021-07-23 |
| 发明（设计）人： | 朱佑民;钟诚;于婷婷;张慧;郑业鸿;雷雨;孟维龙;张文荟;林莉莉 | 申请（专利权）人： | 上海国龙生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N1/19 | 分类号： | C12N1/19;C12N15/62;C12N15/81;C12N9/42;C12N9/40;A23K10/14;A23K20/189;C12R1/84 |
| 代理公司： | 南京禾易知识产权代理有限公司 32320 | 代理人： | 张松云 |
| 地址： | 201612 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明提出了一种表达β‑甘露聚糖酶和α‑半乳糖苷酶的毕赤酵母的制备方法，包括如下步骤：S1、化学合成β‑甘露聚糖酶和α‑半乳糖苷酶的基因序列；S2、酶切S1中所述基因序列并与酶切线性化的毕赤酵母表达载体分别连接或重组，得基因表达质粒；S3、将S2中构架好的基因表达质粒酶切线性化后分别或混合转化入毕赤酵母感受态细胞中；S4、通过His缺陷、G418抗性以及PCR方法筛选出分别或同时含有基因的阳性克隆菌株，得到能够分别或同时表达β‑甘露聚糖酶和α‑半乳糖苷酶的毕赤酵母；所述β‑甘露聚糖酶以及α‑半乳糖苷酶的核苷酸序列两端包含EcoRI和Not1酶切位点序列和载体pPIC9K的同源臂序列。本发明通过β‑甘露聚糖酶和α‑半乳糖苷酶配合使用可以更加彻底地降解半乳甘露聚糖。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 表达 甘露 聚糖 半乳糖 酵母 制备 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
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