[发明专利]一种利用SUMO融合表达系统制备重组肝素酶I的方法及其所制备的SUMO_肝素酶I融合蛋白在审
| 申请号： | 202110097126.5 | 申请日： | 2021-01-25 |
| 公开（公告）号： | CN112980820A | 公开（公告）日： | 2021-06-18 |
| 发明（设计）人： | 蒋建华;张亮;邢岭;吴双;高伟 | 申请（专利权）人： | 上海宝维医药技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/88 | 分类号： | C12N9/88;C12N15/70;C12N15/62;C07K19/00 |
| 代理公司： | 上海中外企专利代理事务所(特殊普通合伙) 31387 | 代理人： | 孙旭华 |
| 地址： | 201611 上海市*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了利用SUMO融合表达系统制备重组肝素酶I的方法及其所制备的肝素酶I，该制备方法包括下列步骤：选择来自肝素黄杆菌(Pedobacter heparinus)的肝素酶I序列，其氨基酸序列如SEQIDNo.1所示，共384aa；去除信号肽序列，获得肝素酶I的DNA序列，如SEQIDNo.2；将所述肝素酶I的DNA序列插入带有N端SUMO蛋白标签的pSMART载体质粒；将正确的质粒转化至BL21(DE3)大肠杆菌感受态细胞中，挑取单克隆，通过发酵和纯化获得融合蛋白；用SUMO蛋白酶将SUMO标签蛋白从融合蛋白上切割下来，即获得肝素酶I。本发明的优点是：提高目标蛋白质的可溶性、促进目标蛋白质的正确折叠，避免形成包涵体；降低纯化成本、提高纯化效率；SUMO蛋白标签分子量较小，对肝素酶I的酶活性影响较小，获得纯化的肝素酶I。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 利用 sumo 融合 表达 系统 制备 重组 肝素 方法 及其 sumo_ 蛋白 | ||
【主权项】：
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