[发明专利]一种突变酶及其应用和酶催化法制备三胜肽的工艺

摘要

本发明涉及生化技术领域，公开了一种突变酶及其应用和酶催化法制备三胜肽的工艺。本发明包括甘氨酸和L‑组氨酸连接酶GHS以及三肽连接酶HKS；或为两者的融合酶。本发明通过改造让Lal酶实现甘氨酸、L‑组氨酸连接酶活力从而获得GHS酶，以及让gshB酶实现二肽甘氨酸‑L‑组氨酸与L‑赖氨酸的合成能力从而获得HKS酶。在此基础上，进一步利用多肽链将GHS酶与HKS酶进行融合，则可以构造一次性连接甘氨酸、L‑组氨酸以及L‑赖氨酸的双功能酶GHKS，从而实现方便的、高收率的制备三胜肽；而对于该酶催化反应中所需要的大量ATP，可以采用多聚磷酸激酶进行循环再生，进而大大降低ATP的用量。