[发明专利]番茄miR172a初级体编码小肽miPEP172a的预测、鉴定与原核表达方法在审
申请号: | 202011047766.7 | 申请日: | 2020-09-29 |
公开(公告)号: | CN112251526A | 公开(公告)日: | 2021-01-22 |
发明(设计)人: | 栾雨时;刘亚荣;宿承璘 | 申请(专利权)人: | 大连理工大学 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12N15/29;C12N15/70;C12N15/11;C12N1/21;C12R1/19 |
代理公司: | 大连格智知识产权代理有限公司 21238 | 代理人: | 刘琦 |
地址: | 116024 辽*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | 本发明提供一种由番茄miR172a初级体编码小肽miPEP172a的预测、鉴定方法,包括以下步骤:S1、前体序列设计引物1;S2、以野生型番茄早粉2号的DNA以及cDNA为模板提取总RNA,并作为模板反转录合成cDNA,再以番茄为模板用引物2进行PCR扩增;S3、筛选鉴定;其原核表达方法包括以下步骤:S1.构建原核表达载体;S2.用重组表达质粒转化大肠杆菌感受态细胞;S3.转化大肠杆菌;S4.接种于卡纳霉素培养基,然后诱导。本发明提出的鉴定预测方法解决了当前对miRNA初级体所编码小肽筛选方法的成本问题,使小肽的快速、低价鉴定成为可能;本发明提出的原核表达方法,显著降低了小肽的合成成本,操作简单,对小肽的大量生产应用具有重要价值。 | ||
搜索关键词: | 番茄 mir172a 初级 编码 mipep172a 预测 鉴定 表达 方法 | ||
【主权项】:
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