[发明专利]一种基于转座酶的DNA/RNA共建库方法、试剂盒及应用在审
申请号: | 202010958566.0 | 申请日: | 2020-09-11 |
公开(公告)号: | CN112195521A | 公开(公告)日: | 2021-01-08 |
发明(设计)人: | 曹振;罗秉轮;宋东亮;秦雪梅;戴广伟 | 申请(专利权)人: | 翌圣生物科技(上海)有限公司 |
主分类号: | C40B50/06 | 分类号: | C40B50/06;C12Q1/6869;C12Q1/6858;C12Q1/70;C12Q1/04 |
代理公司: | 上海宣宜专利代理事务所(普通合伙) 31288 | 代理人: | 刘洁瑜 |
地址: | 200120 上海市浦*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明公开了一种基于转座酶的DNA/RNA共建库方法及其试剂盒,该方法包括步骤:1)从样本中共提取DNA和RNA;2)以RNA为模板,通过逆转录生成cDNA第一链,最终形成RNA/cDNA杂交双链和原始DNA的混合液;3)使用包含转座子序列的转座酶复合体对步骤2)中的RNA/cDNA杂交双链和原始DNA进行片段化,并同时加上接头序列;4)使用逆转录酶和具有链置换活性的DNA聚合酶对产物进行缺口补齐;5)用文库扩增引物对产物进行扩增;6)产物经纯化回收后,得到混合的RNA/DNA文库;7)对步骤6)所得的混合RNA/DNA文库进行质检。该方法具有建库时间短、操作简单、成本低的优点。本发明还公开了上述方法和试剂盒在鉴定微生物种类以及在检测癌症组织样本的基因突变和基因融合方面的应用。 | ||
搜索关键词: | 一种 基于 转座酶 dna rna 共建 方法 试剂盒 应用 | ||
【主权项】:
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