[发明专利]一种EGFR基因19号外显子E746-A750突变基因的检测方法

摘要

本发明涉及基因检测技术领域，且公开了一种EGFR基因19号外显子E746‑A750突变基因的检测方法，包括以下步骤：S1、用E746‑A750位点的PCR扩增引物对不同突变频率的E746‑A750标准品(WT‑E746‑A750、10％‑E746‑A750、1％‑E746‑A750、0.1％‑E746‑A750)进行Taq酶PCR扩增；S2、对不同突变频率的E746‑A750标准品(WT‑E746‑A750、10％‑E746‑A750、1％‑E746‑A750、0.1％‑E746‑A750)PCR扩增产物进行二代测序文库构建；只需对不同突变频率的E746‑A750标准品(WT‑E746‑A750、10％‑E746‑A750、1％‑E746‑A750、0.1％‑E746‑A750)PCR扩增产物进行二代测序文库构建及Cas9酶的消化和Miseq PE300测序，就可以实现对EGFR基因突变型的E746‑A750位点基因的富集及测序检测；相比于现有技术中检测EGFR基因19号外显子E746‑A750突变基因的方法，本技术方案的方法在保证准确率和高检出率的前提下，更重要的是：对于降低检测的背景噪音和检测低频突变更加的可靠。