[发明专利]一种适用于PCR实验的免提取念珠菌核酸样本的制备方法有效
申请号: | 202010224847.3 | 申请日: | 2020-03-26 |
公开(公告)号: | CN111394347B | 公开(公告)日: | 2022-03-01 |
发明(设计)人: | 贺政新 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军联勤保障部队第九八〇医院 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;C12Q1/686;C12Q1/6806 |
代理公司: | 石家庄冀科专利商标事务所有限公司 13108 | 代理人: | 孟玉寒 |
地址: | 050082 河北省石家*** | 国省代码: | 河北;13 |
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摘要: | 一种适用于PCR实验的免提取念珠菌核酸样本的制备方法为酶裂解和热裂解相结合的方式,包括如下步骤:酶裂解液的配制:将酵母裂解酶lyticase、蜗牛酶、β‑巯基乙醇混合,并添加生理盐水至混合液体积为100μL;酶裂解:将念珠菌标本置于eppendorf管中,以PBS洗涤后离心,去除上清,向其中加入步骤a配制的酶裂解液100μL,水浴加热裂解;热裂解:将完成酶裂解水浴的eppendorf管置金属浴中,加热裂解,念珠菌样本经过酶裂解和热裂解后,10000转/分钟低温高速离心10分钟,上清即为制备好的念珠菌DNA样本。本发明采用酶裂解和热裂解相结合的方式制备DNA样本,裂解时间短,免除了提取DNA过程,使裂解产物简单处理后可直接用于PCR实验,提高了PCR扩增的灵敏度。 | ||
搜索关键词: | 一种 适用于 pcr 实验 提取 念珠菌 核酸 样本 制备 方法 | ||
【主权项】:
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