[发明专利]一种低丰度DNA突变测序文库的构建方法在审

专利信息
申请号: 202010017509.2 申请日: 2020-01-08
公开(公告)号: CN111074354A 公开(公告)日: 2020-04-28
发明(设计)人: 浦丹;舒坤贤;刘康雯;曹会勋 申请(专利权)人: 重庆邮电大学
主分类号: C40B50/06 分类号: C40B50/06;C12Q1/6858
代理公司: 重庆辉腾律师事务所 50215 代理人: 王海军
地址: 400065 重*** 国省代码: 重庆;50
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摘要: 发明提供了一种低丰度DNA突变测序文库的构建方法,所述方法采用3'末端封闭的核苷酸单链与待测基因组杂交,使与待测基因组中的野生型序列杂交形成完全互补配对的双链DNA,而与突变型序列形成在突变位点处不能互补的双链DNA,然后加入双链特异性核酸酶消化杂交形成的完全互补配对的双链DNA,从而选择性地富集含有DNA突变的序列;富集后的DNA序列两端连接测序接头,再采用基于梯度关键变性温度的PCR进行扩增,使含不同突变类型的序列在不同关键变性温度下有效扩增,得到能成为高通量测序技术可用的DNA文库。本发明方法构建的低丰度DNA突变测序文库,可提高NGS检测低丰度样本的准确度和灵敏度。
搜索关键词: 一种 低丰度 dna 突变 序文 构建 方法
【主权项】:
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