[发明专利]P-糖蛋白生物亲和色谱柱的制备方法及其应用在审
申请号: | 201910575687.4 | 申请日: | 2019-06-28 |
公开(公告)号: | CN110308233A | 公开(公告)日: | 2019-10-08 |
发明(设计)人: | 童珊珊;陈昱初;余江南;徐希明 | 申请(专利权)人: | 江苏大学 |
主分类号: | G01N30/56 | 分类号: | G01N30/56;G01N30/02 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 212*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明属于医药技术领域,涉及一种富含P‑糖蛋白生物亲和色谱柱的制备方法及其应用。本发明从Caco‑2细胞中提取富含P‑糖蛋白的质膜,与氨基键合硅胶构建P‑糖蛋白生物亲和色谱柱,将构建的P‑糖蛋白生物亲和色谱柱应用在色谱分析中验证其能与P‑糖蛋白为靶点的药物特异性结合,对P‑糖蛋白阳性药物维拉帕米具有特异性亲和吸附功能,而对非P‑糖蛋白靶点的药物无吸附。为P‑糖蛋白靶点药物的筛选提供了新的方法,本发明制备的P‑糖蛋白生物亲和色谱柱经过性能评价,证明具有很强的专属性、稳定性、使用寿命长,具有良好的应用前景。 | ||
搜索关键词: | 糖蛋白 生物亲和 色谱柱 制备 应用 靶点 富含 构建 氨基键合硅胶 医药技术领域 特异性结合 靶点药物 亲和吸附 色谱分析 使用寿命 维拉帕米 性能评价 阳性药物 专属性 吸附 质膜 筛选 验证 细胞 | ||
【主权项】:
1.一种P‑糖蛋白生物亲和色谱柱的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:提取Caco‑2细胞中含有P‑糖蛋白的质膜层于透析袋中,透析后得到富含P‑糖蛋白的质膜溶液,将质膜溶液与氨基键合硅胶混匀后静置离心,沉淀物加入Tris‑HCL溶液混匀后得到的P‑糖蛋白质膜固定相混悬液,将P‑糖蛋白质膜固定相混悬液注入空白柱芯,装柱完全后得到P‑糖蛋白生物亲和色谱柱。
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