[发明专利]一种同时测定金丝桃苷和金丝桃素含量的方法

摘要

本发明公开了一种同时测定金丝桃苷和金丝桃素含量的方法，它包括以下步骤：（1）金丝桃苷和金丝桃素标准曲线的建立：a、对照品溶液的制备；b、对照品溶液的测定；（2）待测样品中金丝桃苷和金丝桃素的含量测定：c、供试品溶液的制备；d、供试品溶液的测定。本发明首次建立了同时测定贯叶金丝桃及相关药品中金丝桃苷和金丝桃素含量的RP‑HPLC方法，可以简便、快速、准确地测定贯叶金丝桃药材及相关药品中金丝桃苷和金丝桃素的含量。本发明准确、快速、专属性好、灵敏度高，可以用于贯叶金丝桃药材及相关药品的快速质量控制。

主权项

1.一种同时测定金丝桃苷和金丝桃素含量的方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤（1）金丝桃苷和金丝桃素标准曲线的制备：取金丝桃苷和金丝桃素对照品，加甲醇配制成系列浓度的对照品溶液；分别注入高效液相色谱仪进行梯度洗脱，测定色谱峰面积，绘制金丝桃苷和金丝桃素的标准曲线；步骤（2）供试品溶液的制备：取待测样品，加乙醇提取，过滤得供试品溶液；步骤（3）供试品溶液中金丝桃苷和金丝桃素含量的测定：取供试品溶液，注入高效液相色谱仪，进行梯度洗脱，测定色谱峰面积，根据步骤（1）所得的标准曲线，计算待测样品中金丝桃苷和金丝桃素的含量；其中，上述步骤（1）和步骤（3）中高效液相色谱条件为：色谱柱：C18色谱柱；检测波长：360 nm，590 nm；柱温：18℃‑25℃；流速：0.8‑1.2 mL·min^‑1；进样量：8‑12 µL；流动相：乙腈‑0.05%磷酸水溶液‑0.30 mol·L^‑1乙酸铵缓冲液；梯度洗脱为：第一梯度：0‑11 min，乙腈25%‑0.05%磷酸水溶液75%；第二梯度：11‑18 min，乙腈90%‑0.30 mol·L^‑1乙酸铵缓冲液10%；第三梯度：18‑22 min，乙腈25%‑0.05%磷酸水溶液75%。