[发明专利]一种重组痘苗病毒表面展示系统载体质粒及应用在审
| 申请号： | 201910069596.3 | 申请日： | 2019-01-24 |
| 公开（公告）号： | CN109706177A | 公开（公告）日： | 2019-05-03 |
| 发明（设计）人： | 阎辉;罗砚曦;刘美丽 | 申请（专利权）人： | 浙江省医学科学院 |
| 主分类号： | C12N15/863 | 分类号： | C12N15/863;C12N7/01;C12R1/93 |
| 代理公司： | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人： | 邱启旺 |
| 地址： | 310013 *** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种重组痘苗病毒表面展示系统载体质粒及应用，所述痘苗载体质粒展示系统的表达框核心组分包括修饰的痘苗病毒H5启动子、大肠杆菌EM7启动子、串联的组氨酸标签、能结合链霉亲和素的多肽片段Nano‑tag15、红荧光蛋白mCherry、Zeocin抗性蛋白、痘苗病毒D8蛋白穿膜区。本发明基于上述质粒构建的重组痘苗病毒能够在病毒外膜表面展示Nano‑tag15，并籍此将重组病毒被链霉亲和素磁珠捕获，以及表面展示红荧光蛋白mCherry与Zeocin抗性标志物，为通过磁珠分选、荧光标记示踪和流式细胞仪分选及药物抗性等方法单独使用或联合使用而快速筛选重组痘苗病毒提供了新的有力手段。 | ||
| 搜索关键词： | 重组痘苗病毒 表面展示系统 表面展示 痘苗病毒 荧光蛋白 载体质粒 启动子 链霉亲和素磁珠 荧光标记示踪 大肠杆菌 流式细胞仪 组氨酸标签 病毒外膜 磁珠分选 单独使用 痘苗载体 多肽片段 抗性标志 抗性蛋白 快速筛选 药物抗性 展示系统 质粒构建 重组病毒 表达框 穿膜区 结合链 亲和素 分选 质粒 修饰 捕获 串联 应用 蛋白 | ||
【主权项】：
1.一种重组痘苗病毒表面展示质粒表达载体，其特征在于，它的核苷酸序列如SEQ ID No.22所示。包括依次连接的修饰的痘苗病毒H5启动子、大肠杆菌EM7启动子、串联的组氨酸标签、能结合链霉亲和素的多肽片段Nano‑tag15、红荧光蛋白mCherry、Zeocin抗性蛋白、以及痘苗病毒D8蛋白穿膜区。所述修饰的痘苗病毒H5启动子的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，大肠杆菌EM7启动子的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示，串联的组氨酸标签的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示，能结合链霉亲和素的多肽片段Nano‑tag15的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示，红荧光蛋白mCherry的核苷酸序列如SEQ ID No.5所示，Zeocin抗性蛋白的核苷酸序列如SEQ ID No.6所示，痘苗病毒D8蛋白穿膜区的核苷酸序列如SEQ ID No.7所示。
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