[发明专利]一种CD137基因修饰人源化动物模型的构建方法及其应用有效
| 申请号： | 201811535784.2 | 申请日： | 2018-12-14 |
| 公开（公告）号： | CN109735498B | 公开（公告）日： | 2020-11-10 |
| 发明（设计）人： | 赵静;琚存祥;马秀英;张明坤;侯欢欢;高翔 | 申请（专利权）人： | 江苏集萃药康生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10;C12N15/85;C12N15/90;A01K67/027 |
| 代理公司： | 南京艾普利德知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 32297 | 代理人： | 张铂 |
| 地址： | 210032 江苏省南京市浦口区*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明基于CRISPR/Cas9技术提供了一种CD137基因修饰人源化动物的制备方法，构建得到一种免疫系统完整、可有效评价抗CD137抗体的CD137基因修饰人源化动物模型。进一步的，本发明以上述模型建立了一种可用于抗CD137抗体的临床前筛选的CD137人源化小鼠药效评价平台，可根据该药效评价平台设计合理的抗CD137抗体的给药方法，为候选抗CD137抗体提供更准确的临床前药效评价方法。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 cd137 基因 修饰 人源化 动物 模型 构建 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
1.一种CD137基因修饰人源化动物细胞的构建方法，其特征在于包括如下步骤：(1)选择动物CD137基因的完整胞外区两端作为打靶位点，设计包含人源CD137基因胞外区的同源DNA供体和鉴定方案；(2)基于CRISPR/Cas9技术，制备Cas9或其表达载体，在动物CD137基因的完整胞外区的5’端和3’端各设计一条sgRNA或者tracrRNA/crRNA二元复合体或各自的表达载体；或者，制备Cas9、sgRNA或者crRNA和tracrRNA的共表达载体；(3)将步骤(2)制备得到的Cas9、sgRNA或者tracrRNA/crRNA二元复合体，或者各自的表达载体或共表达载体注射入受精卵，敲除动物CD137基因的胞外区的同时将人源CD137基因的胞外区插入到基因组。
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