[发明专利]一种香茶菜组培快繁方法

摘要

本发明公开了一种香茶菜组培快繁方法，香茶菜属多年生草本植物，分布在我国大部份省份，多生于山坡、沙质地、山沟。味苦、性微寒。具有清热解毒，健胃，活血祛痰等功用。目前香茶菜主要采用扦插、嫁接和播种等传统方式进行育苗，存在育苗成本高，苗木长势不好、参差不齐、良种潜力未能得到充分发挥等缺点。本发明以优良无性系嫩枝为外植体，通过外植体消毒、诱导培养、丛生芽增殖、不定根发生、炼苗移栽等过程获得了香茶菜离体再植株，建立香茶菜组织培养快速繁殖技术体系，可以保持香茶菜无性系母本的优良性状，有利于香茶菜优良无性系种苗的规模化生产。

主权项

1.一种香茶菜组培快繁方法，其特征在于包括以下步骤：步骤1，外植体采集及消毒：采取香茶菜树桩基部形态表征一致的当年生萌动状态的饱满嫩枝作为外植体，在流水下冲洗4h，浸泡于6%洗衣粉溶液11分钟，用软毛刷8%洗衣粉溶液轻轻刷洗材料，再用自来水以滴水的形式冲洗 91min，用蒸馏水冲洗 6次，于超净工作台中以75%～80%乙醇溶液浸泡61s，无菌水冲洗6次，再用含有0.01～0.05%吐温‑20的0.1～0.5%升汞溶液消毒16min，无菌水冲洗6次后用无菌滤纸吸干表面的水分备用;步骤2，诱导培养：将经步骤1处理后的嫩枝剪成约1.6cm的茎段并接种到诱导培养基进行丛生芽诱导培养,接种后置于每天光照15小时，光照强度为2100lx，置于培养温度为23～25℃，空气相对湿度为75%～80%的条件下培养31天后统计诱导情况; 诱导培养基为：MS+1.1mg/L NAA+8.1mg/L 6‑BA+3.1mg/L KT+1.6g/L AC+31g/L蔗糖+6.1g/L琼脂，pH为5.9；步骤3，丛生芽增殖：将步骤2诱导培养得到丛生芽接种到增殖培养基进行不定芽增殖培养,接种后置于每天光照15小时，光照强度为2100lx，置于培养温度为23～25℃，空气相对湿度为75%～80%的条件下培养41天后统计发芽数; 增殖培养基为：MS+1.6mg/L 2,4‑D+5.1mg/L 6‑BA+1.1mg/L NAA+1.6g/L AC+31g/L蔗糖+6.1g/L琼脂，pH为5.9；步骤4，生根培养：将步骤3增殖中获得的植株无根嫩梢2～3cm从基部切下并接种至生根培养基中进行诱导生根,接种后置于每天光照15小时，光照强度为3100lx，置于培养温度为23～25℃，空气相对湿度为75%～80%的条件下培养31天后统计生根情况; 生根培养基为：White+1.1mg/L NAA+3.1mg/L IBA+31g/L蔗糖+6.1g/L琼脂，pH为5.9；步骤5，炼苗移栽：将生根培养基上获得的具备移栽条件的瓶苗进行炼苗，瓶苗移至常温下 6天后，打开瓶盖 4天，然后洗去附着于苗根系上的培养基，在 1100 倍的生物菌剂中浸泡 11min，然后移栽至盛有所设计的移栽培养基质的容器袋中进行培养，每个容器袋移栽1株生根苗,置于带有遮阴网的自动喷雾的塑料大棚内保温保湿温度控制在 15～35℃，湿度应保持在 75％～85％，避免阳光直射，移栽31天后统计成活率，移栽培养基质为由泥炭土:蛭石:珍珠炭:桔杆炭=3:1:1:1混合而成基质。