[发明专利]一种靶向KIF20A阳性胰腺癌双特异性抗体及其制备方法和应用在审
| 申请号： | 201811302589.5 | 申请日： | 2018-11-02 |
| 公开（公告）号： | CN109400710A | 公开（公告）日： | 2019-03-01 |
| 发明（设计）人： | 贾原;张俊萍;韩亚萍;郭继强;王琳;李芳;王玉华 | 申请（专利权）人： | 山西大医院（山西医学科学院） |
| 主分类号： | C07K16/46 | 分类号： | C07K16/46;C07K16/30;C07K16/28;C07K1/34;A61K39/395;A61P35/00 |
| 代理公司： | 太原申立德知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 14115 | 代理人： | 郭海燕 |
| 地址： | 030032 山*** | 国省代码： | 山西;14 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种靶向KIF20A阳性胰腺癌双特异性抗体及其制备方法和应用。所述抗体通过下述方法制备得到：(1)选购Anit‑CD3+，Anti‑KIF20A单克隆抗体；(2)取人源CD3单克隆抗体，溶于交联剂Traut's试剂中，得到人源CD3单链抗体；(3)取人源KIF20A单克隆抗体，溶于交联剂Sulfo‑SMCC中，得到人源KIF20A单链抗体；(4)将人源CD3单链抗体和人源KIF20A单链抗体混合，室温下经Sephrose‑G25凝胶层析柱分离纯化，取出多余的交联剂，得到单链抗体；(5)将纯化得到的单链抗体立即装入含有缓冲液的透析袋中混合，并于4℃下在缓冲液中透析作用18小时，得到双抗体复合物；(6)采用SDS‑PAGE凝胶电泳鉴定得到的双抗体复合物分子量，Sephrose‑G25凝胶柱纯化并超滤浓缩，得到双特异性抗体复合物。 | ||
| 搜索关键词： | 人源 单链抗体 双特异性抗体 复合物 交联剂 制备方法和应用 胰腺癌 单克隆抗体 缓冲液 双抗体 靶向 凝胶电泳鉴定 凝胶层析柱 凝胶柱纯化 超滤浓缩 分离纯化 透析袋 抗体 透析 制备 装入 取出 | ||
【主权项】：
1.一种靶向KIF20A阳性胰腺癌双特异性抗体，其特征是通过下述方法制备得到：(1)选购Anit‑CD3+，Anti‑KIF20A单克隆抗体；(2)取1mg人源CD3单克隆抗体，溶于0.3‑0.6mM交联剂Traut's试剂中，得到人源CD3单链抗体；(3)取1mg人源KIF20A单克隆抗体，溶于0.3‑0.6mM交联剂Sulfo‑SMCC中，得到人源KIF20A单链抗体；(4)将步骤(2)的人源CD3单链抗体和步骤(3)的人源KIF20A单链抗体混合，室温下经Sephrose‑G25凝胶层析柱分离纯化，取出多余的交联剂，得到单链抗体；(5)将步骤(4)纯化得到的单链抗体立即装入含有缓冲液的透析袋中混合，并于4℃下在缓冲液中透析作用18小时，得到双抗体复合物；(6)采用SDS‑PAGE凝胶电泳鉴定步骤(5)得到的双抗体复合物分子量，Sephrose‑G25凝胶柱纯化并超滤浓缩，得到双特异性抗体复合物。
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