[发明专利]一种单子叶植物miRNA高效沉默载体的构建方法有效
| 申请号： | 201811094016.8 | 申请日： | 2018-09-19 |
| 公开（公告）号： | CN109207510B | 公开（公告）日： | 2022-05-03 |
| 发明（设计）人： | 唐贵良;杨晓玉;李琳;罗淋淋;刘琳;罗光宇 | 申请（专利权）人： | 深圳大学 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82 |
| 代理公司： | 深圳市韦恩肯知识产权代理有限公司 44375 | 代理人： | 李玉平 |
| 地址： | 518054 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明属于基因工程技术领域，要解决传统STTM系统中常用的35S启动子仅在双子叶植物组织中高效表达,在单子叶植物的表达则较弱，不适用于单子叶植物的miRNA沉默的问题。本发明公开了一种单子叶植物miRNA高效沉默载体的构建方法，其包括以下步骤：S1,针对单子叶植物的目标miRNA,制备与之对应的STTM；S2,将S1所述STTM克隆至克隆载体，以获得启动子‑STTM‑终止子结构；S3,通过双酶切的方式将S2所述启动子‑STTM‑终止子结构克隆至双元载体。本发明的构建方法连接效率高，简便可靠，并可避免引入不必要的转基因成分，所构建的单子叶植株STTM载体可高效地沉默单子叶植物miRNA的表达，更有利于后续转基因植株的表型观察和结果解释。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 单子叶植物 mirna 高效 沉默 载体 构建 方法 | ||
【主权项】：
1.一种单子叶植物miRNA高效沉默载体的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：S1,针对单子叶植物的目标miRNA,制备与之对应的STTM；S2,将S1所述STTM克隆至克隆载体，以获得启动子‑STTM‑终止子结构；S3,通过双酶切的方式将S2所述启动子‑STTM‑终止子结构克隆至双元载体。
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