[发明专利]在普通培养箱中培养双歧杆菌的方法及专用的培养基、对应的计数方法

摘要

本发明提供了一种在普通培养箱中培养双歧杆菌的方法及专用的培养基、对应的计数方法，其中，专用的培养基包括MRS‑乳糖固体培养基和果胶固体培养基，MRS‑乳糖固体培养基铺于平板底层且与菌液混合，果胶固体培养基铺于MRS‑乳糖固体培养基之上，平板倒置，37℃普通恒温培养箱中培养。本发明的有益之处在于：本发明提供的专用培养基，双层铺设，使得双歧杆菌在普通的恒温培养箱中培养成为可能；本发明提供的双歧杆菌的培养方法，采用普通的恒温培养箱即可实施，无需使用厌氧培养箱、厌氧培养罐、亨盖特滚管等，不仅在设备和药剂方面投入的资金降低，而且操作简单，普通化验员经过简单培训即可进行操作。

主权项

1.一种在普通培养箱中培养双歧杆菌的方法，其特征在于，包括以下步骤：Step1：配制培养基MRS‑乳糖固体培养基：乳糖20g，蛋白胨10g，牛肉膏10g，酵母粉5g，无水乙酸钠5g，吐温‑80 1ml，柠檬酸氢二铵2g，磷酸氢二钾2g，七水硫酸镁0.58g，一水硫酸锰0.19g，L‑半胱氨酸盐酸盐1g，琼脂10g，加水1000ml，pH6.2～6.5，分装到三角瓶中，115℃灭菌20min；果胶固体培养基：果胶30g，琼脂7g，加水1000ml，放入水浴锅中加热，充分搅拌均匀，115℃灭菌20min；Step2：配制稀释溶液NaCl‑蛋白胨溶液：氯化钠4.3g，蛋白胨1.0g，加水1000ml，搅拌至充分溶解，调节至pH7.0，121℃灭菌15min；Step3：稀释在无菌操作条件下，称取乳酸菌菌粉样品或量取乳酸菌发酵液样品，用稀释溶液稀释到所需的稀释梯度，选择若干个适宜的稀释梯度，吸取1ml菌液移入灭菌的平板中；Step4：倒平板将冷却到45℃的MRS‑乳糖固体培养基均匀的倒入平板中，与菌液混合均匀，冷却到凝固；MRS‑乳糖固体培养基凝固后，在MRS‑乳糖固体培养基的表面倒入冷却到45℃的果胶固体培养基；Step5：培养果胶固体培养基完全凝固后，将平板倒置，放入37℃普通恒温培养箱中培养。