[发明专利]嵌合蜘蛛丝及其用途在审
| 申请号： | 201811026107.8 | 申请日： | 2011-09-28 |
| 公开（公告）号： | CN109136245A | 公开（公告）日： | 2019-01-04 |
| 发明（设计）人： | 马尔科姆·詹姆斯·弗雷泽;兰迪·刘易斯;唐·贾维斯;金佰利·汤普森;约瑟夫·赫尔;苗云根;弗洛伦斯·特磊;宋丰熙;金荣洙 | 申请（专利权）人： | 圣母大学 |
| 主分类号： | C12N15/62 | 分类号： | C12N15/62;C12N15/63;C07K19/00;A01K67/04 |
| 代理公司： | 北京安信方达知识产权代理有限公司 11262 | 代理人： | 刘小立;郑霞 |
| 地址： | 美国印*** | 国省代码： | 美国;US |
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| 摘要： | 本申请涉及嵌合蜘蛛丝及其用途。披露了被工程化为拥有并表达嵌合蜘蛛丝蛋白基因的转基因蚕，该基因编码具有对于蜘蛛丝弹性和/或强度基序序列是特定的蜘蛛丝结构域的嵌合蜘蛛丝蛋白。还提供了具有相对于天然蚕丝纤维改进的强度(张力)和弹性特征的改进的蚕丝纤维。还提供了采用在此披露的转基因蚕制备嵌合丝纤维的改进的方法，该方法采用基于piggyBac的载体系统和辅助质粒。提供了基因表达盒，且其用于创造多种合成的蜘蛛丝编码序列(蜘蛛2、蜘蛛4、蜘蛛6、蜘蛛8)。在辅助质粒的存在下，使用piggyBac载体系统转化突变的蚕，以将嵌合蜘蛛丝基因合并入蚕中以提供稳定的转化体。因而这些转基因蚕提供了适于丝纤维的商业生产的有效的蜘蛛丝生产有机体。 | ||
| 搜索关键词： | 蜘蛛丝 嵌合 蜘蛛 转基因蚕 辅助质粒 载体系统 丝纤维 蜘蛛丝蛋白基因 天然蚕丝纤维 有机体 基因表达盒 蜘蛛丝蛋白 蜘蛛丝基因 改进 编码序列 蚕丝纤维 弹性特征 基序序列 基因编码 商业生产 结构域 转化体 制备 突变 合成 合并 申请 转化 生产 | ||
【主权项】：
1.一种核酸，所述核酸包含：(a)5’末端piggyBac转座子的重复区；(b)包含家蚕丝心蛋白重链(fhc)‑基因的主启动子、上游增强子元件(UEE)和基础启动子的序列；(c)编码嵌合蜘蛛丝多肽的序列，其中所述嵌合蜘蛛丝多肽以从N末端到C末端的方向包含：家蚕丝心蛋白重链(fhc)丝多肽的N‑末端片段；一个或更多个选自由弹性基序序列和强度基序序列组成的组的蜘蛛丝基序序列；以及家蚕fhc丝多肽的C‑末端片段；其中所述一个或更多个蜘蛛丝基序序列包括蜘蛛丝基序序列的14至42个重复片段，每个重复片段以从N末端到C末端的方向包括8至16个拷贝的弹性基序序列(E)和一个拷贝的强度基序序列(S)；其中所述弹性基序序列包含鞭状样弹性基序序列；并且其中所述强度基序序列是牵丝强度基序序列；(d)包含家蚕丝心蛋白重链(fhc)‑基因的转录终止位点和聚腺苷酸化位点的序列；和(e)3’末端piggyBac转座子的重复区。
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