[发明专利]一种饲料中虾青素及其结构类似物的检测方法

摘要

本发明公开一种饲料中虾青素及其结构类似物的检测方法，准确称取饲料样品于离心管，加入低浓度酸溶液混匀，静置。离心管中加入丙酮和正己烷，震荡离心后吸取上清液于刻度比色管。重复上述步骤三次，最后一次加入正己烷提取。合并提取液，避光静置。计算提取液中丙酮和正己烷的比例，作为溶剂用于配制虾青素标准溶液。用分光光度计测定饲料虾青素提取液的吸光值。制作虾青素标准曲线，得到虾青素浓度和吸光值的关系公式，根据公式计算饲料样品中虾青素的含量。本发明操作流程简化，试剂种类涉及少；所使用的试剂和仪器设备均为实验室常用，价格较低，降低了检测成本，不需要配备专业昂贵的仪器。

主权项

1.一种饲料中虾青素及其结构类似物的检测方法，其特征在于包括以下步骤：（1）、称取粉碎的饲料样品并记为m，单位g，装于离心管中，加入酸溶液，混匀后静置后加入丙酮，震荡后加入正己烷，震荡、离心，溶液从下至上分为3层：依次为饲料沉淀层、丙酮‑酸溶液层和丙酮‑正己烷层；吸取95%以上最上层溶液于具塞玻璃刻度比色管，避光放置；（2）、第二次加入丙酮，震荡后第二次加入正己烷，震荡、离心，溶液从下至上分为3层：依次为饲料沉淀层、丙酮‑酸溶液层和丙酮‑正己烷层；吸取95%以上最上层溶液于具塞玻璃刻度比色管，避光放置；步骤（1）和步骤（2）加入的丙酮总体积之50%记为V1；（3）、第三次加入正己烷，震荡、离心，溶液从下至上分为3层：依次为饲料沉淀层、丙酮‑酸溶液层和丙酮‑正己烷层；吸取95%以上最上层溶液于具塞玻璃刻度比色管，避光放置；步骤（1）、步骤（2）和步骤（3）加入的正己烷总体积记为V2；（4）、合并三次提取液，其体积记为V，单位mL，混匀后避光静置，待测；（5）、按V1：V2的比例配制虾青素标准溶液的溶剂，并称取虾青素标准品溶解于所述标准溶液的溶剂中，定容后作为虾青素储存溶液存放于冰箱；（6）、取不同剂量的虾青素储存溶液，用V1：V2比例的丙酮‑正己烷混合溶液稀释，得到不同浓度的虾青素测定溶液，然后在470~500nm波长范围内，以V1：V2比例的丙酮和正己烷混合溶剂作为空白试剂调零，利用某一浓度虾青素溶液检测分光光度计的最大吸收波长，依次测定该波长下不同浓度虾青素溶液和饲料虾青素提取液的吸光值，并得到吸光值和虾青素浓度关系标准曲线或者吸光值和虾青素浓度关系式；（7）、根据吸光值和虾青素浓度关系标准曲线或者吸光值和虾青素浓度关系式得到提取液中虾青素及其类似物浓度C(ug/mL)，采用公式①计算饲料中虾青素的含量：  ①S表示饲料中虾青素及其类似物的含量，单位是mg/kg。