[发明专利]一种具有催化活性转氨酶的提取方法在审
| 申请号： | 201810935519.7 | 申请日： | 2018-08-16 |
| 公开（公告）号： | CN109182287A | 公开（公告）日： | 2019-01-11 |
| 发明（设计）人： | 叶质强;周拥军;冯露;鄂松;王心洁 | 申请（专利权）人： | 湖北省宏源药业科技股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/10 | 分类号： | C12N9/10 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 438600 湖北省*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明提出一种具有催化活性的转氨酶的提取方法，通过对含有转氨酶的菌体细胞离心、洗涤和破碎后再加入硫酸铵溶液去掉破碎细胞体，得到上清溶液，再向上清溶液内加入硫酸铵进行静置沉淀和分离得到转氨酶粗品，最后向转氨酶粗品中加入混合溶液进行搅拌、离心和出去上清后得到成品转氨酶；本发明提出通过硫酸铵盐析沉淀分离出菌体细胞内的活性转氨酶，通过纯化水、聚乙二醇和二甲基亚砜配置出的混合溶液可以洗掉盐析转氨酶粗品中大部分的硫酸铵，同时该混合溶液不会溶解转氨酶，提取效率高，并能保持转氨酶的催化活性，过程中不会产生大量的废水，环保且成本低廉适用于大规模的生产。 | ||
| 搜索关键词： | 转氨酶 催化活性 混合溶液 粗品 硫酸铵 菌体细胞 清溶液 破碎 二甲基亚砜 硫酸铵溶液 硫酸铵盐析 沉淀分离 静置沉淀 提取效率 纯化水 盐析 洗涤 溶解 废水 环保 配置 生产 | ||
【主权项】：
1.一种具有催化活性的转氨酶的提取方法，其特征在于：包括如下步骤：步骤一：通过发酵培养并诱导出含有转氨酶的菌体细胞，再经过离心、洗涤和破碎得到转氨酶混合液；步骤二：向上述步骤一中的转氨酶混合液中加入浓度为6%—30%的硫酸铵溶液，控制温度低于10℃，再离心去掉破碎细胞体，得到上清溶液；步骤三：向上述步骤二中的上清溶液中加入硫酸铵进行静置沉淀，沉淀后进行离心，得到转氨酶粗品；步骤四：向上述步骤三中的转氨酶粗品中加入混合溶液，进行搅拌，搅拌后进行离心，离心后再去除上清，得到成品转氨酶固体后进行真空冷冻干燥保存即可。
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