[发明专利]用于鉴别犬瘟热病毒野毒株与疫苗株的Taqman探针荧光定量PCR检测试剂盒及应用

摘要

本发明公开了一种用于鉴别犬瘟热病毒野毒株与疫苗株的Taqman探针荧光定量PCR检测试剂盒及应用。所述的试剂盒中含有用于扩增犬瘟热病毒野毒株以及疫苗株H基因保守区域的通用引物以及分别用于鉴别犬瘟热病毒野毒株或疫苗株的特异性探针。实验证明，使用本发明建立的Taqman探针荧光定量PCR检测试剂盒检测鉴别CDV野毒株和疫苗株，灵敏度可达1个拷贝，能检测出的病毒量低至1TCID₅₀/mL，高于常规PCR方法的10³和10²个拷贝，且与5种其他病原核酸检测均呈阴性。因此，使用本发明建立的试剂盒鉴别CDV野毒株和疫苗株具有特异性强、灵敏度高和稳定性好的特点，能够快速鉴别出犬瘟热病毒野毒株和疫苗株感染。

主权项

1.用于鉴别犬瘟热病毒野毒株与疫苗株的Taqman探针荧光定量PCR检测试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒中含有用于扩增犬瘟热病毒野毒株以及疫苗株H基因保守区域的通用引物以及分别用于鉴别犬瘟热病毒野毒株或疫苗株的特异性探针，其中，所述的通用引物由上游引物和下游引物组成，所述的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述的下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，用于鉴别犬瘟热病毒野毒株的特异性探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，用于鉴别犬瘟热病毒疫苗株的特异性探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示，所述的探针的5’端添加荧光基团，3’端添加淬灭基团。